[发明专利]生物样品的数字聚合酶链式反应的微流体系统以及相应方法在审
申请号: | 201910764194.5 | 申请日: | 2019-08-19 |
公开(公告)号: | CN110835600A | 公开(公告)日: | 2020-02-25 |
发明(设计)人: | C·斯坦纳特;M·齐德 | 申请(专利权)人: | 豪夫迈·罗氏有限公司 |
主分类号: | C12M1/38 | 分类号: | C12M1/38;C12M1/02;C12M1/00 |
代理公司: | 北京坤瑞律师事务所 11494 | 代理人: | 封新琴 |
地址: | 瑞士*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 生物 样品 数字 聚合 链式反应 流体 系统 以及 相应 方法 | ||
1.一种用于生物样品的数字聚合酶链式反应dPCR的微流体系统(1;1’),所述微流体系统(1;1')包括:
至少一个微流体设备(2),所述微流体设备具有入口(23)、出口(24)、将所述入口(23)连接到所述出口(24)的流动通道(25)、以及与所述流动通道(25)处于流体连通的反应区域阵列(26);
流动回路(3),所述流动回路可连接到所述微流体设备(2),用于使液体流动通过所述微流体设备(2)的所述流动通道(25);
样品液源,所述样品液源可连接到所述微流体设备(2),用于为所述微流体设备(2)提供样品液(27);
主密封液源,所述主密封液源可连接到所述微流体设备(2),用于为所述微流体设备(2)提供初始密封液(28)以将所述样品液(27)密封在所述反应区域阵列(26)内部;
次密封液源(4),所述次密封液源可连接到所述微流体设备(2),用于为所述微流体设备(2)提供附加密封液(29);以及
泵送装置(31),所述泵送装置连接到所述流动回路(3)并且被适配成将所述附加密封液(29)泵送通过所述流动通道(25)。
2.权利要求1的微流体系统(1;1'),其中任何密封液(28,29)都是不混溶的液体,优选地,其中任何密封液(28,29)是油和如硅酮液等聚合物液中的一种或其混合物,进一步优选地,其中所述初始密封液(28)和所述附加密封液(29)由相同的密封液材料组成。
3.权利要求1或2的微流体系统(1;1'),其中所述主密封液源和所述次密封液源(4)由不同的密封液储器或由公共密封液储器实施,优选地,其中所述初始密封液(28)是未回火密封液。
4.前述权利要求中任一项的微流体系统(1;1'),其中所述泵送装置(31)由控制单元控制以根据需要将所述附加密封液(29)泵送通过所述流动通道(25),以便将气泡冲洗出所述流动通道(25),优选地,其中所述泵送装置(31)被控制成将预定量的所述附加密封液(29)泵送通过所述流动通道(25),进一步优选地,其中所述泵送装置(31)被控制成不断地、间歇地、或在检测到所述流动通道(25)中的气泡时将所述附加密封液(29)泵送通过所述流动通道(25)。
5.前述权利要求中任一项的微流体系统(1;1'),其中所述微流体系统(1;1')还包括连接到所述流动回路(3)的气泡阱(32),用于将气体与密封液(28,29)分离,所述气泡阱(32)安排在所述微流体设备(2)的所述出口(24)下游。
6.前述权利要求中任一项的微流体系统(1;1'),其中
所述微流体系统(1;1')用于对以所述样品液(27)形式提供到所述反应区域阵列(26)的每个构件的所述生物样品进行测定;和/或
以连接端口的形式实施所述入口(23)和/或所述出口(24),用于将所述微流体设备(2)与所述样品液源连接,用于将所述微流体设备(2)与所述主密封液源连接,和/或用于将所述微流体设备(2)与所述次密封液源(4)连接;和/或
所述微流体设备(2)至少由底层(21)和顶层(22)构成,其中所述底层(21)或所述顶层(22)提供所述反应区域阵列(26)、所述入口(23)和所述出口(24),并且其中所述流动通道(25)建立在所述底层(21)与所述顶层(22)之间,并与所述反应区域阵列(26)处于流体连接,优选地,其中每个反应区域是微孔或纳米孔,进一步优选地,其中所述微流体设备(2)是微流体芯片;和/或
所述样品液(27)是包含所述生物样品和dPCR测定所需试剂的水溶液,优选地,其中首先使所述样品液(27)流动通过所述流动通道(25)进入所述反应区域阵列(26),并且其中在将所述样品液(27)提供到所述反应区域阵列(26)之后,使所述初始密封液(28)流动进入所述微流体设备(2)的所述流动通道(25)。
7.前述权利要求中任一项的微流体系统(1;1'),其中所述微流体系统(1;1')还包括用于检测所述微流体设备(2)中气泡的存在或生成的检测装置,优选地,其中所述检测装置是光学成像设备,进一步优选地是光学相机。
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