[发明专利]一种样品中抗菌药的检测方法及应用有效
申请号: | 201910764480.1 | 申请日: | 2019-08-19 |
公开(公告)号: | CN110484594B | 公开(公告)日: | 2020-12-29 |
发明(设计)人: | 黄显会;许颖;邱阳阳;胡大兴;梁立杰 | 申请(专利权)人: | 华南农业大学 |
主分类号: | C12Q1/18 | 分类号: | C12Q1/18;C12Q1/04 |
代理公司: | 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 | 代理人: | 孙凤侠 |
地址: | 510642 广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 样品 抗菌 检测 方法 应用 | ||
1.一种样品中抗菌药的检测方法,其特征在于,将样品和空白对照分别采用酸性水溶液、水、碱性水溶液进行提取,得到待测样品提取液和对照提取液,然后分别检测待测样品提取液和对照提取液的MIC值,并进行比较;
当待测样品提取液的MIC值明显小于对照提取液的MIC值时,则证明样品中存在抗菌药;若二者的MIC值相当,或待测样品提取液的MIC值明显大于对照提取液的MIC值时,则证明样品中不存在抗菌药;
所述样品为植物精油类提取物或者含有植物精油类提取物的添加剂;所述空白对照是与所述样品具有相同植物精油类提取物的其过饱和溶液。
2.根据权利要求1所述样品中抗菌药的检测方法,其特征在于,所述酸性水溶液的pH值为1~4;所述碱性水溶液的pH值为10~14。
3.根据权利要求1至2任一项所述样品中抗菌药的检测方法,其特征在于,包括如下步骤:
S1.取3份待测样品和3份空白对照,分别加入酸性水溶液、水、碱性水溶液进行提取,得到3份待测样品提取液和3份对照提取液;
S2.采用相同的方法检测步骤S1制得的3份待测样品提取液和3份对照提取液的MIC值,并进行比较即可。
4.根据权利要求3所述样品中抗菌药的检测方法,其特征在于,步骤S1中,待测植物精油类提取物与所述酸性水溶液、水或碱性水溶液的质量体积比为:0.04~0.2g/mL。
5.根据权利要求3所述样品中抗菌药的检测方法,其特征在于,步骤S1是将待测样品或者空白对照,分别加入酸性水溶液、水、碱性水溶液,超声后,调节溶液pH,振荡后离心处理,分别取水相过滤即得。
6.根据权利要求5所述样品中抗菌药的检测方法,其特征在于,所述提取采用超声提取,超声提取的时间为10~30min,温度20~60℃;所述离心处理的转速为4000~8000rpm,时间为5~10min;所述超声后调节溶液pH值,酸性溶液pH调至1~4,碱性溶液pH调至10~14,水溶液不需要调节pH值;所述振荡的速度为100~350/min,时间为10~30min。
7.根据权利要求3所述样品中抗菌药的检测方法,其特征在于,步骤S2中,MIC值的测定采用肉汤稀释法药敏试验进行检测;所述肉汤稀释法药敏试验采用大肠杆菌25922、沙门氏菌 14028或金黄色葡萄球菌 29213进行检测。
8.权利要求1至7任一项所述方法在判断检测植物精油类提取物类添加剂或保健药中是否添加抗菌药方面的应用。
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