[发明专利]青春双歧杆菌CCFM1061、其发酵食品及菌剂制备方法

权利要求书

1.青春双歧杆菌CCFM1061（Bifidobacterium adolescentic），于2019年06月28日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，地址为广州市先烈中路100号大院59号楼5楼，广东省微生物研究所，保藏编号为GDMCC No：60706。

2.制备青春双歧杆菌CCFM1061菌剂的方法，其特征在于：包括，

菌株培养基的制备；

菌株保护剂的制备；

接种培养、冻干；

其中，青春双歧杆菌CCFM1061（Bifidobacterium adolescentic），于2019年06月28日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，地址为广州市先烈中路100号大院59号楼5楼，广东省微生物研究所，保藏编号为GDMCC No：60706。

3.如权利要求2所述的制备青春双歧杆菌CCFM1061菌剂的方法，其特征在于：所述菌株培养基，为改良MRS培养基，其配方为胰蛋白胨10g、牛肉浸膏10g、酵母粉5g、葡萄糖20g、醋酸钠5g、柠檬酸氢二铵2g、磷酸氢二钾2g、七水硫酸镁0.5g、吐温-80 1mL、一水合硫酸锰0.25g、半胱氨酸盐酸盐0.5g，水1000 mL；调整其pH为6.5±0.2。

4.如权利要求2或3所述的制备青春双歧杆菌CCFM1061菌剂的方法，其特征在于：所述菌株保护剂，其配方为100 g/ L~150g/ L脱脂奶粉、100 g/ L~150g/ L麦芽糊精、140 g/ L~160 g/ L海藻糖、余量为水，冻干，得到冻干保护剂。

5.如权利要求4所述的制备青春双歧杆菌CCFM1061菌剂的方法，其特征在于：所述菌株保护剂，其配方为120 g/ L脱脂奶粉、120 g/ L麦芽糊精、150 g/ L海藻糖、余量为水，冻干，得到冻干保护剂。

6.如权利要求2所述的制备青春双歧杆菌CCFM1061菌剂的方法，其特征在于：所述接种培养、冻干，包括，青春双歧杆菌CCFM1061以5%的接种量接种到在119~123℃条件下灭菌15~25 min后的所述菌株培养基中，在温度35~39℃厌氧条件下培养24~48 h，用pH为6.8~7.2磷酸盐缓冲液清洗2~4次，用所述菌株保护剂重悬，使菌浓达到10¹⁰ CFU/mL；接着，让该菌株重悬液在温度37℃厌氧条件下预培养50~70 min，再在-15~-20℃预冻8~14 h，之后真空冷冻干燥。

7.如权利要求6所述的制备青春双歧杆菌CCFM1061菌剂的方法，其特征在于：青春双歧杆菌CCFM1061以5%的接种量接种到在121℃条件下灭菌20 min后的培养基中，在温度37℃厌氧条件下培养24 h，用pH为6.8磷酸盐缓冲液清洗2~4次，用所述的保护剂重悬，使菌浓达到10¹⁰ CFU/mL；接着，让该悬浮液在温度37℃厌氧条件下预培养60 min，再在-15℃预冻12h，之后真空冷冻干燥。

8.一种发酵食品，其特征在于：使用权利要求2所述的青春双歧杆菌CCFM1061菌剂进行发酵，所述菌剂含有大于10⁶ CFU/g的活性青春双歧杆菌CCFM1061。

9.如权利要求8所述的发酵食品，其特征在于：所述发酵食品包括乳制品、豆制品与果蔬制品。

10.如权利要求9所述的发酵食品，其特征在于：所述发酵食品，包括，西番莲核桃发酵乳饮料，其制备方法为，核桃仁用0.5%的NaOH水溶液煮沸5min，将碱液去除，去除核桃仁表面的种皮，用清水洗涤去除核桃仁表面残留的碱液，按照料水比 1：8 打浆，西番莲果实洗净后打浆，核桃仁浆液与西番莲浆液以9：1的比例混合后过滤，均质，补加2%木糖醇，115℃，灭菌20min，将所述青春双歧杆菌CCFM1061菌剂以10⁹CFU/m L接种到西番莲核桃仁的混合物中，37℃恒温培养箱中发酵12h。