[发明专利]一种夏天无生物碱的检测方法

说明书

本发明公开了一种夏天无生物碱的检测方法。该检测方法通过向夏天无溶液中滴加一定量的生物碱沉淀剂，观察是否产生沉淀，可用于夏天无总碱制备过程渗漉终点、树脂吸附或交换终点和树脂洗脱终点的判断，该检测方法与采用薄层色谱鉴别和高效液相色谱检测相比，具有快速、简便的特点。

技术领域

本发明涉及中药领域，特别涉及一种夏天无生物碱的检测方法。

背景技术

《中国药典》2015年版一部收载夏天无为罂粟科(Papaveraceae)紫堇属 CorydalisDC．植物伏生紫堇 Corydalis decumbens(Thunb．)Pers．的干燥块茎，味苦、微辛，性温，归肝经，具有活血通络、行气止痛的功效，主要用于中风偏瘫、头痛、跌扑损伤、风湿痹痛、腰腿疼痛等，临床上以夏天无为主要活性成分的中成药有复方夏天无片、夏天无注射液、夏天无滴眼液等。

夏天无主要成分为生物碱类成分，夏天无总生物碱量为2％～3％，多属于苯酞异喹啉类、苄基异喹啉类、原小檗碱类及简单异喹啉类，其中叔胺类生物碱(如原阿片碱、延胡索乙素)在原药材中的含量约为季铵类生物碱(如盐酸小檗碱、巴马亭)的8倍。

张笑敏等人在对夏天无化学成分和药理作用研究现状综述的基础上， 根据刘昌孝院士提出质量标志物(Q-marker)的新概念，从植物次生代谢物角度分析其有效成分的物质基础，追溯不同类型生物碱特异性的生源途径，分析成分与新的药效用途、药动学及体内过程、传统功效和传统药性的相关性，密切中药有效性-物质基础-质量控制标志性成分的关联度。通过系统的文献论证和预测分析，初步筛选原阿片碱、延胡索乙素、巴马汀、毕枯枯灵、四氢药根碱、别隐品碱可考虑作为夏天无的质量标志物。

复方夏天无片等中成药中夏天无总碱的制法：取夏天无粉碎成粗粉，用1％盐酸浸泡48小时后进行渗漉，至生物碱提取完全，所得渗漉液通过阳离子交换树脂进行离子交换，当交换柱流出液开始呈生物碱的阳性反应为止，分别用少量的水、乙醇依次洗涤，将树脂晾干，再用碱性乙醇（用氨试液调pH值9～10）分次回流洗脱，至洗脱液呈现生物碱阴性反应为止，合并洗脱液，回收乙醇，于80℃以下干燥，即得。

目前，夏天无总碱生产过程提取液、交换柱流出液和树脂洗脱液生物碱反应采用的是碘化铋钾沉淀反应，具体操作方法为：取少量溶液，加入几滴碘化铋钾试液，观察是否产生沉淀。

申请人通过对夏天无总碱高效液相色谱指纹图谱研究发现，夏天无总碱中主要含原阿片碱、延胡索乙素、毕枯枯灵、药根碱、巴马亭五种生物碱；同时在利用指纹图谱技术跟踪夏天无总碱生产过程发现，目前采用的碘化铋钾沉淀反应判定方法存在较大问题，主要表现为有些呈生物碱阳性反应的溶液经高效液相色谱分析，检测不到原阿片碱、延胡索乙素、毕枯枯灵、药根碱、巴马亭等主要生物碱成分或含量极低；而有些呈生物碱阴性反应的溶液反而又检出原阿片碱、延胡索乙素、毕枯枯灵、药根碱、巴马亭等主要生物碱成分。

发明内容

本发明的目的在于提供一种夏天无生物碱的检测方法，该检测方法可提高夏天无生物碱制备过程中生物碱反应结果的可靠性，同时又保留快速、简便的特点。

本发明提供的夏天无生物碱检测方法为：取夏天无溶液适量，加入碘化铋钾试液，当夏天无溶液与碘化铋钾试液体积比不低于60:1时，如果产生沉淀，则每毫升夏天无溶液中含原阿片碱、延胡索乙素、毕枯枯灵、药根碱、巴马亭总量不低于10μg。

其中，所述的夏天无溶液可以是夏天无的提取液或者是夏天无提取液经树脂吸附或交换后的溶液又或者夏天无提取液经树脂吸附或交换后的洗脱液。

夏天无提取液可以是夏天无药材用酸水溶液加热提取或渗漉提取或超声提取的溶液，也可以是夏天无药材采用其它溶剂比如一定浓度的乙醇水溶液提取的溶液。