[发明专利]一种优种板栗成熟胚组织培养快繁育苗的方法

说明书

本发明提供了一种优种板栗成熟胚组织培养快繁育苗的方法，包括以下步骤：(1)优种板栗的选取、清洗及消毒；(2)板栗成熟胚的获取及接种；(3)外植体的培养；(4)组培苗的驯化炼苗。本发明提供的方法采用成熟胚作为外植体进行组织培养大大提高了板栗的萌发成苗率、缩短了育种周期、加速了良种繁育，提高了板栗种质创新和新品种选育效率，对推动国家质检总局地理标志产品“罗田板栗”产业发展具有重要意义。

技术领域

本发明属于果树培植技术领域，具体涉及一种优种板栗成熟胚组织培养快繁育苗的方法。

背景技术

板栗(Castanea mollissima)为壳斗科(Fagaceae)栗属(Castanea moll)植物，同属植物有7种，分布于亚、欧、美、非4大洲，是重要的生态经济林树种。在栗属植物中，中国板栗在品质、抗病性等利用特性上占居重要的地位。大别山区湖北段地处该省东部，介于北纬30°10′～32°30′、东经112°40′～117°10′之间，该地所属的北亚热带季风气候区形成温暖湿润的气候非常适合板栗生长，板栗种质资源十分丰富。该区的罗田、麻城、大悟、英山4个县市为主产县市，占全区板栗产量的80％以上，其中罗田是板栗的原生地之一，是我国南方板栗的中心主产区。现有种植面积达5万公顷，年产量高达6万吨、系列年产值20亿元，是“全国板栗生产第一县”，产量占湖北省的1/3、全国的5％，系列产值占全县国内生产总值的20.58％。

“桂花香”是罗田板栗的主栽品种，果壳暗紫色，富有光泽，果肉黄色，味甜肉嫩，有桂醇香味，含蛋白质9.1％，淀粉42.7％，总糖含量35.4％。具有果实品质优良、丰产性好、成熟期早、耐旱及耐贮藏等特点，是罗田县最佳板栗品种之一。

湖北省栗园大都是在丘陵地带和山地，有的栗树与其他林木混植，这种复杂的生态环境以及粗放的生产管理容易导致多种病虫害混杂发生，从而影响板栗的质量和产量，造成严重的经济损失。因此，培育抗疫病性的板栗新品种具有重要的生态和经济意义。但实际生产过程中，由于板栗极难生根，扦插繁殖生根率很低，人们普遍沿用实生繁殖的方式，实生后代性状变异复杂，造成良种化程度低。

离体培养技术作为现代育种技术的基础和良种繁育的重要手段，受到了极大青睐。通过组织培养可以快速繁殖，可以克服传统板栗育苗周期长、生根率低、操作繁琐等一系列弊端，建立板栗良种繁育体系。研究表明，植物胚进行离体培养，可以不经过休眠而萌动，克服休眠种子在发育上的障碍，促进胚的生长和缩短育种周期；还能克服种子本身，特别是种皮对胚萌发的抑制作用；不仅如此，还能克服种子的自然不育性。尤其是成熟胚，其能吸收培养基中的无机盐和糖，经过自身代谢作用合成所必须的物质，是进行离体培养的最佳选择。然而，由孙立新等人发明的专利“优种板栗组培快速繁植方法”(CN200410092406.3)和由钟天路等人发明的专利“一种栗子的组织培养技术”(CN201811447190.6)，分别选择以生长活性较强的一年生板栗茎段和带芽茎段作为外植体进行组织培养，虽然最终都得到了板栗幼苗，但是高度分化的茎段需要经过脱分化和再分化才能得到完整植株，该处理过程不仅会增加组织培养的投入，而且其出芽率也会受到影响，从而无法真正实现板栗的高效快繁育苗。因此，亟需一种以板栗成熟胚作为外植体的、高效完善的快速育苗方法。

发明内容

为了解决上述技术问题，本发明提供一种以板栗成熟胚作为外植体的、高效完善的优种板栗成熟胚组织培养快繁育苗的方法。

本发明提供的技术方案如下：

一种优种板栗成熟胚组织培养快繁育苗的方法，包括以下步骤：

(1)优种板栗的选取、清洗及消毒；

(2)板栗成熟胚的获取及接种；

(3)外植体的培养；

(4)组培苗的驯化炼苗。

具体的，