[发明专利]一种湖北麦冬离体培养的快速繁殖方法

权利要求书

1.一种湖北麦冬离体培养的快速繁殖方法，其特征在于：主要包括以下步骤：

(1)取湖北麦冬茎尖或茎段，对其进行表面灭菌处理，得到无菌湖北麦冬茎尖或茎段；

(2)将步骤(1)得到的无菌湖北麦冬茎尖或茎段接入诱导培养基进行愈伤组织诱导，愈伤组织诱导后进行不定芽分化培养，即得到分化好的愈伤组织和不定芽；其中，所述不定芽分化培养分为两个阶段，即不定芽分化培养前期和不定芽分化培养后期，愈伤组织诱导与不定芽分化培养前期的培养条件为暗培养15-20d，培养温度23±1℃，相对湿度40-60％，不定芽分化培养后期的培养条件为光培养10-15d，培养温度23±1℃，相对湿度40-60％；

(3)将步骤(2)得到的分化好的愈伤组织和不定芽接入继代增殖培养基进行增值培养，得到增殖不定芽；所述增殖培养的条件为环境光照3000-5000lx，温度23±1℃，相对湿度40-60％；

(4)将步骤(3)得到的增殖不定芽接入生根培养基进行生根培养，得到生根后的试管苗；所述生根培养的条件为环境光照5000-8000lx，温度23±1℃，相对湿度40-60％；

(5)将步骤(4)得到的生根后的试管苗进行驯苗移栽；

其中，

所述诱导培养基的组成成分及终浓度为：MS、1.0mg/L 6-BA、0.25mg/L NAA、蔗糖30g/L、琼脂7.0g/L、pH 5.8-6.2；所述继代增殖培养基的组成成分及终浓度为：MS、1.0mg/L 6-BA、0.25mg/L NAA、1.0mg/L GA、蔗糖30g/L、琼脂7.0g/L、pH 5.8-6.2；所述生根培养基的组成成分及终浓度为：1/2MS、0.25mg/L NAA、蔗糖20g/L、琼脂7.0g/L、pH 5.8-6.2。

2.根据权利要求1所述的一种湖北麦冬离体培养的快速繁殖方法，其特征在于，所述步骤(1)中，湖北麦冬茎尖或茎段的灭菌处理方法为：取湖北麦冬茎尖或茎段，流水冲洗20-30min，70％酒精处理15s，无菌水冲洗1次，超净工作台上用0.1％的升汞加土温20溶液1-2滴处理10-12min，无菌水冲洗干净。

3.根据权利要求1所述的一种湖北麦冬离体培养的快速繁殖方法，其特征在于，所述训苗移栽方法为：将具有4-5片叶的生根后的试管苗根部的培养基洗净，根部用800倍百菌清浸泡1-2min，栽植于腐叶土:蛭石:珍珠岩体积比为2:1:1的基质中后，移至训苗室内，其后一周内采取降温、增湿、遮阳措施调控环境条件，逐步向外界的自然条件过渡，同时，每5-7d喷一次800倍多菌灵，15-20d后始喷0.1％尿素和磷酸二氢钾液或稀释的完全营养液，7-10d喷一次，以补充营养。