[发明专利]用于快速检测人胃幽门螺旋杆菌的试剂和试剂盒

说明书

提供了一种检测试剂，包括尿素、金属镍和必要的溶剂。此外，还提供了用于检测人胃幽门螺旋杆菌的试剂盒，包括取样器、反应器和试纸；该反应器容纳有前述检测试剂。该试剂和试剂盒可实现人胃幽门螺旋杆菌的快速检测，并且准确性和特异性高，检测时间短。

技术领域

本发明属于生物检测技术领域；涉及一种用于快速检测人胃幽门螺旋杆菌的试剂和试剂盒。

背景技术

胃幽门螺旋杆菌(简称HP)是一种人体胃粘膜内的螺旋状革兰氏阴性细菌，它是导致慢性胃炎、胃溃疡、甚至胃癌的主要致病因素。流行病学研究表明我国及大多数发展中国家中的幽门螺旋杆菌阳性率随着年龄增加而上升，我国20-40岁的感染率为45.4％-63.6％,70岁以上的感染率高达78.9％，儿童大约在10岁以后阳性率大约为10％_～20％，因此发展有效快速的HP检测方式具有非常重要和现实的临床意义。

HP感染的临床检测方法主要分为侵入性与非侵入性两种。侵入性检测方法有一定创伤性，凝血功能差、服用抗凝药物的患者或者患儿依从性较差；而非侵入性检测方法创伤性较小，弥补了侵入性检测依从性差的不足；同时具有价格低廉、简便快速等特点，受到了研发者的广泛关注。常见的非侵入性检测方法包括¹³C和¹⁴C-尿素呼吸测试(UBT)、¹⁵N-尿氨排出试验(UDT)、基于抗体-抗原免疫反应原理的胶体金法、快速尿素酶检验方法和分子生物学方法。

其中，快速尿素酶检验方法不仅反应速度较快，而且费用较低。这种方法的原理是：幽门螺杆菌产生的尿素酶分解后得出产物CO₂和NH₃，后者会导致pH值升高，从而增加胃黏膜组织的碱性，因此可以通过pH值的颜色变化来进行判断是否受到幽门螺杆菌的感染。

山东大学郭拥军等人在中国专利申请CN1916608A中公开了一种定性检测幽门螺杆菌感染的反应盒，包括盒体和设在盒体内的应用试剂，表面有浅凹的塑料反应板以及华特门试纸；该试纸是经1％的尿素溶液和酚红指示剂完全浸透再晾干的试纸，应用试剂是蒸馏水和1％的尿素酶溶液。该方法原料来源丰富，价格低廉；检测速度快，并且定性准确。然而，该试纸在长时间室温保存后由于尿素分解而失效，同时该反应盒在低温条件下(15℃)下的准确性大大降低。

李雄等人在中国专利申请CN104263812A中公开了一种唾液快速检测幽门螺杆菌的方法及其试剂盒，该方法包括以下步骤：收集唾液0.5-1ml，吸取出0.2±0.02ml唾液后，用pH试纸检测剩余唾液pH值并记录；将吸出的唾液与检测液充分混合后反应5-20分钟，用pH试纸检测反应液的pH值并记录；将反应液的pH值与唾液pH值比较，如果反应液的pH值大于或等于唾液pH值时，其反应结果视为阳性，即含有尿素酶，存在幽门螺杆菌；如果反应液的pH值低于唾液pH值时则反应结果视为阴性，即不含尿素酶，不存在幽门螺杆菌。该方法的的灵敏性、特异性、阳性预测值和阴性预测值与¹⁴C-UBT接近，两者检测结果差异无统计学意义。然而，该检测方法的pH值测量误差较大，同时活性较低，检测时间较长。

总之，上述快速尿素酶检验方法均在不同程度上存在着准确性不高、检测时间较长以及特异性不高等技术缺陷。因此针对现有技术中的上述缺陷，迫切需要寻找一种可靠的用于快速检测人胃幽门螺旋杆菌的试剂和试剂盒。

发明内容

本发明的目的之一是提供一种新的用于快速检测人胃幽门螺旋杆菌的试剂，该试剂可实现人胃幽门螺旋杆菌的快速检测，并且准确性和特异性高，检测时间短。

本发明的目的之二是提供一种使用上述试剂快速检测人胃幽门螺旋杆菌的试剂盒。

发明人发现，本发明的试剂和试剂盒利用新型金属镍纳米粒子的催化技术，通过纳米材料高比表面，高催化特性，快速灵敏地实验对唾液中尿素酶的检测，从而判断HP的存在。该试剂盒操作简单、易行、可靠、可重复、应用广泛、成本低、对检查者安全、不污染环境、克服了背景技术的缺点。