[发明专利]多能干细胞的培养基、培养方法及其应用

权利要求书

1.一种干细胞培养基，其特征在于，由如下组分组成：体积比为1：（0.2~1）的DMEM/F12和Neurobasal，N2添加剂 0.25~1%，B27添加剂 0.5~2%，GlutaMAX 1~2mM，非必需氨基酸0.5~1%，β-巯基乙醇0.05~0.1mM，左旋抗坏血酸-2-磷酸镁盐20~100μg/mL，重组人活化素A10~20 ng/mL，IWP2 2~5μM，CHIR99021 0.3~0.6μM。

2.根据权利要求1所述的干细胞培养基，其特征在于，所述非必需氨基酸包含L-甘氨酸、L-丙氨酸、L-天冬酰胺、L-天冬氨酸、L-谷氨酸、L-脯氨酸和L-丝氨酸。

3.根据权利要求2所述的干细胞培养基，其特征在于，所述非必需氨基酸中，L-甘氨酸、L-丙氨酸、L-天冬酰胺、L-天冬氨酸、L-谷氨酸、L-脯氨酸和L-丝氨酸的浓度均为10 mM。

4.权利要求1~3任一项所述的干细胞培养基在干细胞培养或建系中的应用。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述干细胞为多能干细胞。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述干细胞为人多能干细胞或非人灵长类多能干细胞。

7.一种干细胞的培养方法，其特征在于，利用权利要求1~3任一项所述的干细胞培养基进行干细胞的培养。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述培养为将干细胞接种于含饲养层细胞或基质胶的体系中进行贴壁培养，或者将干细胞接种于低吸附材料上进行悬浮培养。

9.根据权利要求7或8所述的方法，其特征在于，所述干细胞为多能干细胞。