[发明专利]一种富集脲原体的培养基、冻干保存脲原体的保护剂及其制备方法与冻干保存脲原体的方法

权利要求书

1.一种冻干保存脲原体的方法，脲原体菌种接种至培养基中，37℃培养14-18h，当其pH值变为7.50~7.90时，按照1mL/瓶分装菌悬液，每瓶菌悬液与等体积的冻干后的保护剂混合冻干保存；

所述保护剂由无水海藻糖、胰酪蛋白胨、聚乙烯吡咯烷酮和水组成；

各成分用量为：无水海藻糖100 g·L^-1、胰酪蛋白胨50 g·L^-1、聚乙烯吡咯烷酮K30 20g·L^-1、余量为水；

所述培养基由如下有效成分组成：

2.根据权利要求1所述的方法，所述培养基按照以下方法制备：

（1）将Hepes/MOPS/MES任选一种缓冲液、胰蛋白胨、月示蛋白胨、氯化钠、硫酸锰、胆固醇、DNA加水混合，调pH至6.0±0.5，121℃高温高压灭菌15min，恢复室温得到基础培养基备用；

（2）将马血清、牛心浸出液、酵母抽提物、L-半胱氨酸盐酸盐、尿素溶液、葡萄糖、青霉素G、两性霉素B、维生素B1和D-泛酸钙分别用0.22μm孔径的滤器过滤后加入上述基础培养基中搅拌均匀。

3.根据权利要求1所述的方法，所述冻干保存的冻干条件为-40℃预冻4h，-40℃~-15℃升华18h，-15℃~28℃干燥6h。

4.根据权利要求1所述的方法，所述保护剂的冻干条件为-40℃预冻4h，-40℃~-15℃升华18h，-15℃~28℃干燥6h。