[发明专利]自组装多肽及其作为止血剂的用途

说明书

本发明公开了自组装多肽及其作为止血剂的用途；所述多肽为RAKA16、REKD16或RKDE16。RAKA16、REKD16、RKDE16具有自组装凝胶化的特性，其溶液遇到DMEM培养基或血液时能够自组装形成水凝胶。本发明利用了这三种多肽的自凝胶化的特性，制备了一系列新型多肽止血剂，能够有效的对伤口进行止血。

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，具体涉及自组装多肽及其作为止血剂的用途。

背景技术

具有自组装凝胶化特性的多肽由于其优异的原位凝胶特性和生物相容性，近年来逐渐成为国内外化学、生物学、医学领域研究者关注的热点。这类多肽的自组装行为是由分子间的静电相互作用力、氢键相互作用力以及亲疏水相互作用力共同作用下实现的，故属于物理交联水凝胶的范畴。具有代表性是自组装多肽是RADA，它最初是由美国麻省理工学院和香港大学的Ellis-Behnke小组报道的(Nanomedicine，2006，2:207-215)。其溶液具有快速凝胶化的特性，1％的RADA溶液在与DMEM培养基混合后即可在15s内生成水凝胶。此外，它还广泛的应用于各种组织工程的研究中(Nanoscale,2017,9:16281–16292；Journal ofControlled Release 2017,261:234-245)。

在各种意外事故或者手术过程中，如果人体的出血量过大，除了按压、包扎、缝合等传统止血手段外，还需要止血剂来辅助止血。如果一类止血剂在发挥止血作用的过程中启动了人体自身的凝血血机制，则该止血剂属于药物范畴，如凝血酶类止血剂、纤维蛋白胶类止血剂等等；如果一类止血剂在止血过程中仅仅是通过吸收伤口血液或者使伤口血液凝胶化，而不触发人体自身的凝血机制，则该类止血剂属于医疗器械范畴，例如氧化纤维素止血膜、壳聚糖止血粉等等。自组装多肽的溶液具有遇到血液快速凝胶化的特性，其自凝胶机制是溶液中的多肽分子遇到血液中带电荷的氨基酸分子时，触发了其自组装凝胶化，形成的血液凝胶能够封堵住伤口，从而作为止血剂来使用。自组装多肽止血剂的止血过程不涉及人体自身的凝血机制，故属于医疗器械范畴。

经过对现有专利文献的检索发现，中国发明专利CN 101267831 B公开了用于促进止血和其它生理活动的组合物和方法，其列举了多种多肽序列；但这些多肽序列的核心理念是相邻重复单元之间的正负电荷交替。

发明内容

本发明的目的在于提供自组装多肽及其作为止血剂的用途；所述多肽简称为RAKA16、REKD16、RKDE16。RAKA16、REKD16、RKDE16能够溶解于纯水、生理盐水中，在其质量浓度为0.5％-3％时，其能够在溶剂中快速溶解，并呈现溶液态。RAKA16、REKD16、RKDE160.5％-3％溶液在与DMEM培养基以体积比2:1-1:1混合后，其溶液能够形成水凝胶，其凝胶时间为10s-40s。

本发明的目的是通过以下技术方案来实现的：

本发明涉及具有自组装特性的多肽，所述多肽包含的氨基酸为赖氨酸(K)、丙氨酸(A)、天冬氨酸(D)、谷氨酸(E)、精氨酸(R)，多肽序列中氨基酸个数为16个。

作为本发明的一个实施方案，所述多肽为RAKA16多肽，包含如SEQ ID NO.1所示的序列。对应的序列结构为：Ac-RADA-KAEA-RADA-KAEA-NH₂。

作为本发明的一个实施方案，所述多肽为REKD16多肽，包含如SEQ ID NO.2所示的序列。对应的序列结构为：Ac-RARA-EAEA-KAKA-DADA-NH₂。

作为本发明的一个实施方案，所述多肽为RKDE16多肽，包含如SEQ ID NO.3所示的序列。对应的序列结构为：Ac-RARA-KAKA-DADA-EAEA-NH₂。

本发明中，利用固相合成法制备相应多肽。