[发明专利]一种数字图像比色法检测食品中亚硝酸盐的方法

说明书

本发明涉及一种数字图像比色法检测食品中亚硝酸盐的方法。本发明利用NO^‑在酸性条件下具有氧化性，可以氧化3,3',5,5'‑四甲基联苯胺(TMB)生成黄色的TMB二亚胺，采用智能手机对实验结果进行拍照，然后用图像处理软件采用RGB模型对采集的图像进行处理，将可视化的颜色转化为可处理的数据，实现食品样品中亚硝酸盐的定量检测。本发明方法操作简单方便、使用仪器易得，实验结果准确可靠，所需成本较低，可以实现现场快速检测。

技术领域

本发明涉及一种数字图像比色法检测食品中亚硝酸盐的方法，属于食品检测技术领域。

背景技术

亚硝酸盐是最广泛的工业用盐之一，常用作食品添加剂和防腐剂，在肉类加工(如火腿和香肠)中常被用作防腐剂和发色剂，使肉制品拥有良好的色泽、适宜的风味和抗菌性。然而其潜在的毒性对人类健康构成了巨大的威胁，吸入少量亚硝酸盐可导致急性中毒，长期摄入可导致癌症。在胃酸的作用下，亚硝酸盐可以与仲胺、酰胺等反应生成N-亚硝胺类致癌物，容易损伤肾脏、脾脏、神经系统，引起多种癌症。此外，亚硝酸盐还会与人体血液中的血红蛋白发生不可逆反应产生高铁血红蛋白，这种化合物会降低血液的运氧能力，从而引起“高铁血红蛋白症”或“蓝婴综合症”，对孕妇和婴儿有极大的危害。人体中的亚硝酸盐主要是通过膳食摄入，因此监测食品中的亚硝酸盐含量具有重大意义。

目前世界上常见的亚硝酸盐的检测方法主要有荧光法、化学发光法、电化学法、荧光毛细管淬灭法、离子色谱法、分光光度法等。虽然这几种检测方法灵敏准确，但需要昂贵的仪器、专业的操作人员、耗时的程序、复杂的样品处理过程和大量的样品、以及合成的材料不稳定、成本高等缺点，极大地限制了其在现场食品检验中的应用，所以建立一种可以现场快速检测亚硝酸盐的方法具有较大的实际意义。

发明内容

(一)要解决的技术问题

为了解决现有技术的上述问题，本发明提供一种亚硝酸盐的检测方法，具体是涉及食品产品中亚硝酸盐的现场快速准确便捷的数字图像比色检测方法。

(二)技术方案

为了达到上述目的，本发明采用的主要技术方案包括：

一种数字图像比色法检测食品中亚硝酸盐的方法，其包括如下步骤：

S1、样品处理：准确称取样品加水后进行匀浆，定容，沸水浴后冷却，过滤取上清液，加亚铁氰化钾溶液和乙酸锌溶液，摇匀离心去除脂肪，再次过滤，取滤液作为样品处理液待测；

S2、配置不同浓度的亚硝酸盐标准品，用于制备标准曲线的制作；

S3、将TMB显色剂与磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液与样品处理液混合反应后进行拍照获得样品照片；采用不同浓度的亚硝酸盐标准品与TMB显色剂与磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液反应后进行拍照获得标准品照片；

S4、将上述获得标准品照片，用图像处理软件选取RGB模式对图像读取G和B通道的数据进行数据处理，绘制标准曲线；

将样品照片的RGB模式的数据代入标准曲线中即可获得样品中亚硝酸盐的浓度。

在一个优选的实施方案中，在步骤S1中，所述沸水浴的时间为10～20min；所述亚铁氰化钾溶液的浓度为0.25mol/L，所述乙酸锌溶液的浓度为1mol/L；所述离心为5000r/min，5min。

进一步，所述样品为5g，加水为30mL～50mL、70℃～80℃；定容为50mL～100mL，取上清液为9mL～15mL，所述亚铁氰化钾溶液和乙酸锌溶液分别为150μL～300μL。

在一个优选的实施方案中，在步骤S2中，所述亚硝酸盐标准品中NaNO₂标样的浓度线性范围为10μmol/L～440μmol/L。