[发明专利]一种提高罗汉果甜甙V含量的方法

说明书

一种提高罗汉果甜甙V含量的方法，所述的方法在采摘前使用诱导剂处理罗汉果果实，所述的诱导剂为海藻糖、茉莉酸甲酯或蔗糖、茉莉酸甲酯。本发明通过罗汉果甜甙V诱导剂直接作用于罗汉果幼小果实，能够促进罗汉果醇及其低糖基化甜甙的生成，以及向甜甙V的转化和积累，提升诱导剂的作用效率，处理后的罗汉果甜甙含量超过对照的50～100％；同时本发明无需对环境要求严格的组培苗及其他生长发育间段的植株进行处理，同时减少果实处理的频率，处理方法简单有效，适合工业化生产。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，特别涉及一种提高罗汉果甜甙V含量的方法。

背景技术

罗汉果是我国传统的药食两用植物，含有多种活性成分，强甜味的非糖物质三萜类成分罗汉果甜苷是其主要的有效成分，其中罗汉果甜苷V的含量最为丰富。且因罗汉果甜苷V甜度高，热量低，色泽浅，水溶性及稳定性好，食用安全，1996年，我国批准该产品为食品添加剂，可作为甜味剂部分或全部代替蔗糖而广泛用于各类饮料食品，尤其是作为肥胖病及糖尿病患者的代用糖。研宄表明，罗汉果甜苷作为功能性高效天然甜味剂具有广泛的应用前景。

罗汉果中的罗汉果甜苷属于葫芦烷三萜苷类化合物，主要包括罗汉果苷IV、罗汉果苷V与赛门苷I等,其中以罗汉果苷V含量最高，约占鲜果重0.4～0.5％。市场上50％和90％含量甜苷V提取物价格分别高达4000元/kg和20000元/kg，因此在食品、保健品、日用健康用品领域仍无法与蔗糖竞争。

目前提高罗汉果甜苷V含量的方法主要有两个：第一，通过提取纯化的方法提升甜苷V的含量，如中国专利CN106967142B“一种同时提取罗汉果甜苷V、Ⅵ和11-O基苷V的方法”等；第二，通过使用新兴甜甙V诱导剂提升罗汉果中甜苷V的含量，如：

中国专利CN106718920B公开了一种提高罗汉果甜苷V含量的方法，包括以下步骤：步骤一、将茉莉酸甲酯溶于体积分数为20％的乙醇水溶液中，配制成浓度为50mmol/L的茉莉酸甲酯的乙醇母液；将茉莉酸甲酯溶于乙醇中，配制成浓度为50～400μmol/L的茉莉酸甲酯溶液；步骤二、将罗汉果组培苗接种在固体培养基中，其中，在制作固体培养基时将茉莉酸甲酯的乙醇母液添加到固体培养基中，使茉莉酸甲酯的最终浓度为50～400μmol/L；步骤三、将组培苗移栽至田间，在罗汉果授粉后50～60d，每天早、中、晚各喷洒一次茉莉酸甲酯溶液，连续喷洒10d。

中国专利CN108277197A公开了一种提高罗汉果悬浮细胞中罗汉果甜甙Ⅴ含量的方法，所述方法通过在罗汉果悬浮细胞培养周期的第5～11天，分别添加10～200mg/L的酵母诱导物以及50～260mg/L的茉莉酸甲酯，从而提高罗汉果甜甙Ⅴ的合成速率以及产量。

但上述诱导剂的使用存在有一定缺陷，茉莉酸甲酯处理幼苗和植株，并不能直接作用于罗汉果果实，诱导剂的作用效率不高；同时，该诱导剂能同时提高甜甙II或VI的含量，作用目标不专一。

发明内容

本发明的目的在于克服上述现有技术之不足，提供一种提高罗汉果甜甙V含量的方法，显著提高罗汉果果实成熟过程中甜甙V的合成和积累。

本发明的目的是通过下述方案来实现的：

本发明提供一种提高罗汉果甜甙V含量的方法，所述的方法在采摘前使用诱导剂处理罗汉果幼嫩果实，所述的诱导剂为海藻糖、茉莉酸甲酯或蔗糖、茉莉酸甲酯。

优选地，所述诱导剂的浓度为海藻糖100～700mM，茉莉酸甲酯5～20mM；

优选地，所述诱导剂的浓度为蔗糖100～700mM，茉莉酸甲酯5～20mM；

优选地，所述诱导剂的配制方法如下：把3.5～4.8克MS粉末溶于1000毫升水，配制MS培养液，用MS培养液配制含海藻糖、茉莉酸甲酯或蔗糖、茉莉酸甲酯的甜甙V诱导剂；

优选地，所述诱导剂处理的方式为涂抹或喷雾；