[发明专利]一种高强度的稀土蛋白粘合剂及其制备方法有效
申请号: | 201910777870.2 | 申请日: | 2019-08-22 |
公开(公告)号: | CN110373152B | 公开(公告)日: | 2021-08-17 |
发明(设计)人: | 刘凯;孙静;马超;张洪杰 | 申请(专利权)人: | 中国科学院长春应用化学研究所 |
主分类号: | C09J189/00 | 分类号: | C09J189/00;C09J11/06 |
代理公司: | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人: | 付丽 |
地址: | 130022 吉*** | 国省代码: | 吉林;22 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 强度 稀土 蛋白 粘合剂 及其 制备 方法 | ||
1.一种高强度的蛋白粘合剂,由超级正电荷蛋白和阴离子型表面活性剂制成;
所述阴离子型表面活性剂为6-(3-(3,4-邻二苯酚)丙酰胺)己基硫酸钠;
所述超级正电荷蛋白按照以下步骤进行表达:
将超级正电荷蛋白K系列载体质粒转化进毕赤酵母或大肠杆菌表达菌株,挑取单克隆菌落,用LB培养液进行过夜培养;将过夜活化的表达种子液加入TB培养基,待菌液达到OD600数值为0.8时,加入诱导剂异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷并降温到30度进行过量表达;诱导12小时收集菌体,用裂解缓冲液重悬,加入蛋白酶抑制剂,DNA酶,溶菌酶,用高压破碎机破碎菌体,10000rpm转速以上离心,收集上清液,HPLC纯化,最终得到超级正电荷蛋白;
所述超级正电荷蛋白的电荷数为72~108;
所述超级正电荷蛋白与所述阴离子表面活性剂的摩尔比为(0.5~2):1。
2.根据权利要求1所述的蛋白粘合剂,其特征在于,所述蛋白粘合剂由超级正电荷蛋白、阴离子型表面活性剂和金属离子制成;
所述金属离子为Fe3+和/或Tb3+。
3.根据权利要求2所述的蛋白粘合剂,其特征在于,所述阴离子型表面活性剂与金属离子的摩尔比为3:(0.5~2)。
4.根据权利要求1或2所述的蛋白粘合剂,其特征在于,所述蛋白粘合剂的含水量为5~15%。
5.如权利要求1所述的高强度的蛋白粘合剂的制备方法,包括以下步骤:
A)将超级正电荷蛋白和阴离子表面活性剂分别溶于超纯水中,得到超级正电荷蛋白溶液和阴离子表面活性剂溶液;
所述阴离子型表面活性剂具有邻苯二酚结构单元;
B)将所述阴离子表面活性剂溶液滴加至超级正电荷蛋白溶液中,混合均匀,得到粘合剂溶液;
C)将所述粘合剂溶液离心后冻干0.5~1小时,得到高强度的蛋白粘合剂。
6.根据权利要求5所述的制备方法,其特征在于,所述离心的速率为15000~18000rpm;
所述离心的时间为5~20min。
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