[发明专利]分子标志物penk及其在三阴性乳腺癌药物中的应用

说明书

本发明涉及一种分子标志物penk及其在三阴性乳腺癌药物中的应用，通过Oncomine数据库收集筛选以及基于qRT‑PCR技术的患者组织样本检验，证实penk在TNBC中的表达显著下调，在数据库中平均下调倍数为3.69，在病人组织样本中平均下调98.05％。表明了penk作为TNBC分子标记物的可靠性以及可重复性。本发明证实penk显著抑制TNBC癌细胞的增殖、转移和侵袭，促进细胞周期阻滞和细胞凋亡，从而影响肿瘤的发展。本发明同时证实了penk过表达体系在动物体内对TNBC肿瘤的治疗效果。过表达penk能显著抑制肿瘤生长，抑瘤率为37.5％，并显著下调肿瘤转移相关因子、炎症因子和信号通路相关因子。组织病理学分析penk治疗后肿瘤组织有明显坏死。以上都说明了penk药物在动物体内对TNBC肿瘤的治疗效果显著。

技术领域

本发明属于肿瘤学与分子生物学领域，具体涉及penk基因作为TNBC分子标志物及在制备治疗TNBC药物中的应用。

背景技术

据发表在Pharmacogenomics期刊上的文章(PMID:29095114，DOI:10.2217/pgs-2017-0117)报道，乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一，女性终身患病率高达12.5％。目前乳腺癌的最佳治疗方式是通过手术切除乳腺组织，但由于乳腺癌容易转移，会引起身体其他组织的癌变，最终只能通过化疗维持生命。三阴性乳腺癌(triple negative breastcancer，TNBC)是雌激素受体、孕激素受体以及人类表皮因子受体均为阴性的乳腺癌亚型，占乳腺癌总数的15％-20％。由于TNBC缺乏上述靶点，因此常规的靶向治疗难以发挥作用，至今尚无明确有效的治疗方案，细胞毒性化疗是目前临床上应用最为广泛的治疗方法。但即便接受最佳的化疗后，TNBC患者的五年存活率也只有不到30％，而且化疗产生的副作用对患者的身心都造成了巨大伤害。因此，寻找诊断和治疗TNBC的有效靶点就显得尤为重要。

前脑啡肽(proenkephalin，penk)是内源性阿片样多肽激素的一种，经蛋白酶切割后可产生脑啡肽，脑啡肽在中枢神经系统中起着至关重要的作用。脑啡肽可与中枢神经系统的受体相结合，通过下丘脑-垂体-肾上腺的信号轴调控机体的生命活动，增加自然杀伤细胞和巨噬细胞活性，提高机体的免疫反应能力及抗肿瘤能力。据发表在Journal ofClinical Oncology的文章(PMID:26169618，DOI:10.1200/JCO.2014.59.7682)报道，女性血浆中penk表达量与乳腺癌发生率呈负相关，penk表达量低的中老年和绝经后妇女乳腺癌风险显著增加，penk可作为乳腺癌预防和治疗的潜在靶点。Penk高表达会通过激活p53和NF-κB的活性，从而促进细胞凋亡。流行病学研究表明，乳腺癌患者发生脑转移概率约为10～16％，而penk表达降低则会促进细胞运动和粘附，大幅提高脑转移的风险。目前penk在肿瘤领域的研究相对较少，乳腺癌领域更鲜少报道。申请人前期研究结果表明penk在TNBC患者中的表达显著下调，推测penk可能在TNBC中发挥重要作用。

基于此，研究penk表达变化对TNBC发生和发展的影响，对诊断和治疗TNBC的方法，具有重要意义。

发明内容

本发明解决的技术问题是：针对TNBC缺乏明确的分子靶标，为实现准确诊断和有效治疗TNBC，本发明的目的之一为提供penk基因作为TNBC的分子标记物。本发明的又一目的在于提供penk在制备治疗TNBC药物中的应用。

本发明的技术方案是：一种分子标志物penk，所述penk的基因序列的Gene ID为5179。

本发明的进一步技术方案是：分子标志物penk在三阴性乳腺癌药物中的应用，其特征在于，包括以下步骤：

步骤一、构建penk-pcDNA过表达载体以及设计penk-siRNA敲除序列作为基因药物，提高或降低TNBC细胞内penk表达量；