[发明专利]一种卵巢早衰相关基因全外显子扩增及检测方法在审
| 申请号： | 201910786769.3 | 申请日： | 2019-08-23 |
| 公开（公告）号： | CN110564839A | 公开（公告）日： | 2019-12-13 |
| 发明（设计）人： | 张丹;黄荷凤;张润驹;李静怡;刘益枫;陈松长;徐谷峰 | 申请（专利权）人： | 浙江大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6883 | 分类号： | C12Q1/6883;C12Q1/6806 |
| 代理公司： | 33212 杭州中成专利事务所有限公司 | 代理人： | 周世骏 |
| 地址： | 310058 浙江*** | 国省代码： | 浙江;33 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 扩增 卵巢 检测 早衰 扩增产物 外显子 引物 提取基因组DNA 凝胶成像系统 生物基因检测 应用前景广阔 琼脂糖电泳 外显子扩增 自动测序仪 检测材料 特异性强 同步扩增 相关基因 阴性对照 基因 阳性率 试验 测序 检出 优化 分析 | ||
【权利要求书】：
1.一种卵巢早衰相关基因全外显子扩增及检测方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)从检测材料中提取基因组DNA；
(2)利用SEQ ID NO：1～120共120条引物，针对FMR1、FOXL2、FSHR、POF1B、INHA、NOBOX、GDF9、BMP15、FIGLA共9个基因全部外显子进行扩增试验；扩增试验及阴性对照共计61个PCR反应是同步进行的，所述120条引物的Tm值范围为57～62℃；
(3)采用琼脂糖电泳和凝胶成像系统对扩增产物进行检测；
(4)使用自动测序仪对扩增产物的测序结果进行分析。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(1)中的检测材料是指新鲜的静脉血。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤(2)中进行扩增试验时，使用由以下体积的组分组成的扩增试剂：
其中，GoldStar Best MasterMix为扩增试剂，是由PCR缓冲液、dNTPs、Mg2+、热启动高保真聚合酶、PCR稳定剂/增强剂和超纯水组成的预混体系，浓度为2×。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤(2)中使用的扩增程序如下：
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于浙江大学，未经浙江大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201910786769.3/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
