[发明专利]一种利用咪唑使特氏杜氏藻积累β-隐黄素及玉米黄素的方法

说明书

本发明一种利用咪唑使特氏杜氏藻积累β‑隐黄素及玉米黄素的方法，属于食品科学技术领域。该方法包括如下步骤：将特氏杜氏藻细胞接种至液体培养基中，培养，在培养过程中测定藻液的光密度，待OD630达到0.7～1.1时加入咪唑100～1000ppm，继续培养2～6d，然后测量β‑隐黄素及玉米黄素含量。本发明加入咪唑之后能够快速，有效地提高特氏杜氏藻中β‑隐黄素及玉米黄素的含量。本发明中使用的咪唑效果显著，生效迅速，且成本很低，是一种有效且经济的提高特氏杜氏藻中β‑隐黄素及玉米黄素的方法。

技术领域

本发明属于食品科学技术领域，具体涉及一种利用咪唑使特氏杜氏藻积累β-隐黄素及玉米黄素的方法。

背景技术

特氏杜氏藻是一种无细胞壁的单细胞绿藻，能够在盐度范围为0.5M～5.5M的环境中生长。特氏杜氏藻的高耐盐性使其可以在海水，咸水湖及盐池中生活，并在高盐水体中形成优势种群。特氏杜氏藻对环境适应力强，易于繁育，不会在水体表面结块，因此具有在室外甚至开放水域低成本大规模培养的可能性。此外，在高光及硝酸盐充足的情况下，特氏杜氏藻会在细胞内积累高价值的类胡萝卜素如β-胡萝卜素及叶黄素。因此，特氏杜氏藻被认为是天然类胡萝卜素的重要来源。

β-隐黄质(beta-cryptoxanthin)又名β-隐黄素，是一种羟基化的β-胡萝卜素，也是唯一具有维生素A原活性的叶黄素，多存在于水果和蔬菜中，其中以橘子，红辣椒以及南瓜含量相对较高，具有多种对人体健康很重要的功能。β-隐黄素可以作为视黄醇的来源，还是一种体外抗氧化剂，由于其抗氧化，抗癌特性，骨骼疾病预防能力，β-隐黄素也在全球市场中引起关注。玉米黄素由β-隐黄素羟化而成，是一种叶黄素类色素，一般用作天然食品着色剂，同样在蔬菜及水果中广泛存在。虽然玉米黄素不能在人体内转化为维生素A，但是也具有保护视力，预防心血管疾病等功效。天然来源的β-隐黄质及玉米黄素一般来自花果，生产提纯成本很高，因此急需寻找更合适的原料来源。特氏杜氏藻含有一种催化非亚铁血红素β-胡萝卜素羟化酶，通过羟化β-胡萝卜素形成β-隐黄素，并进一步生成玉米黄素。因此，特氏杜氏藻具有大量累积β-隐黄素及玉米黄素的潜质。

发明内容

为了满足市场对于大量且廉价的天然β-隐黄素及玉米黄素的需求，本发明的目的在于提供一种利用咪唑使特氏杜氏藻积累β-隐黄素及玉米黄素的方法。该方法显著地提高了特氏杜氏藻中β-隐黄素及玉米黄素的含量。本发明中使用的咪唑效果显著，生效迅速，且成本很低，是一种有效且经济的提高特氏杜氏藻中β-隐黄素及玉米黄素的方法。

本发明的目的通过下述技术方案实现：

一种利用咪唑使特氏杜氏藻积累β-隐黄素及玉米黄素的方法，包括如下步骤：

将特氏杜氏藻细胞接种至液体培养基中，培养，在培养过程中测定藻液的光密度(OD值)，待OD630达到0.7～1.1(优选为1.0)时加入咪唑，继续培养2～6d(优选为4～6d，进一步优选为4d)，然后测量β-隐黄素及玉米黄素含量。

所述的培养的条件为：在光照度为6000～10000Lx，其中积累β-隐黄素的最优光照度为8000Lx，积累玉米黄素的最优光照度为10000Lx；光暗周期为16h/8h，温度为27～28℃，以转速50r/min的转速震荡培养。

所述的咪唑的加入量为100～1000ppm，优选为250～1000ppm；进一步优选为500～750ppm；更进一步优选为500ppm。

所述的液体培养基为：配制特氏杜氏藻基本培养液，向基本培养液中加入A5微量元素溶液，调节pH，灭菌、冷却至室温，得到液体培养基。