[发明专利]一种磁控三维细胞培养物调控方法

说明书

本发明涉及组织工程与再生医学领域，特别是涉及一种三维细胞培养物调控方法。本发明提供一种三维细胞培养物调控方法，包括：A)提供磁性颗粒标记的三维细胞培养物；B)在受磁场作用的条件下，调控步骤A)所提供的三维细胞培养物。本发明所提供的三维细胞培养物调控方法，可以通过磁控手段将三维组织的构建过程与调控过程有序连接，实现了三维培养物的快速构建。

技术领域

本发明涉及组织工程与再生医学领域，特别是涉及一种三维细胞培养物调控方法。

背景技术

三维细胞培养体系的建立推动了类器官，微组织等技术的发展。也作为组织发育，疾病研究和药物筛选的模型，推动了生物医学领域研究的进步。然而，由于类器官、微组织等细胞聚合物等三维培养过程高度依赖细胞的自聚集特性，使得仅有胚胎干细胞、多能干细胞等特殊的干细胞能够形成三维多细胞结构，且产物具有极高的变异性；同时这一类三维培养要求高、过程复杂、费时长；构建三维结构由于缺乏血供系统，使得所形成的产物大小局限在直径500um左右，远远小于正常组织和器官的大小。以上均限制了其发展，特别是在器官移植和再生医学方面的发展。因此亟须要一种技术能够精确操控这一类三维组织的构建，并且改变传统的通过化学因子的调控手段。

发明内容

鉴于以上所述现有技术的缺点，本发明的目的在于提供一种三维细胞培养物调控方法，用于解决现有技术中的问题。

为实现上述目的及其他相关目的，本发明提供一种三维细胞培养物调控方法，包括：

A)提供磁性颗粒标记的三维细胞培养物；

B)在受磁场作用的条件下，调控步骤A)所提供的三维细胞培养物。

在本发明一些实施方式中，在受磁场作用的条件下，步骤A)所提供的三维细胞培养物在培养过程中被拉伸，优选在多个方向上被拉伸。

在本发明一些实施方式中，所述三维细胞培养物选自微组织、类器官、细胞聚集体、多层细胞膜片中的一种或多种的组合。

在本发明一些实施方式中，通过细胞内吞磁性颗粒的方法构建磁性颗粒标记的三维细胞培养物。

在本发明一些实施方式中，磁性颗粒标记的三维细胞培养物的构建方法包括：将细胞在包括磁性颗粒的培养液中共培养以提供磁性颗粒标记的细胞，通过磁性颗粒标记的细胞形成磁性颗粒标记的三维细胞培养物。

在本发明一些实施方式中，培养液中磁性颗粒的含量为10-100ug/ml，培养时间为2～4h。

在本发明一些实施方式中，所述细胞选自干细胞、成体细胞中的一种或多种的组合。

在本发明一些实施方式中，所述干细胞选自胚胎干细胞、多能干细胞、间充质干细胞中的一种或多种的组合。

在本发明一些实施方式中，所述成体细胞选自软骨细胞、骨细胞、上皮细胞、纤维细胞、内皮细胞、肝细胞中的一种或多种的组合。

在本发明一些实施方式中，所述磁性颗粒的材质包括四氧化三铁、三氧化二铁中的一种或多种的组合。

在本发明一些实施方式中，所述磁性颗粒的粒径为1～100nm。

在本发明一些实施方式中，所述磁性颗粒具有生物相容性。

在本发明一些实施方式中，所述磁场作用的条件中，磁场强度为50mT～500mT。

在本发明一些实施方式中，所述调控方法用于调控三维细胞培养物的形状。

在本发明一些实施方式中，所述调控方法用于调控细胞增殖和/或组织生长。

在本发明一些实施方式中，所述调控方法用于调控细胞的分化倾向，优选为血管化倾向或神经化倾向。