[发明专利]离体肺脏机械灌注液及其制备方法和应用

说明书

本发明涉及一种离体肺脏机械灌注液及其制备方法和应用，离体肺脏机械灌注液包括基础培养基、人血清白蛋白、聚蔗糖、右旋糖酐、甘露醇和硝酸甘油；离体肺脏机械灌注液中，人血清白蛋白的浓度为5g/L～20g/L，聚蔗糖的浓度为25g/L～70g/L，右旋糖酐的浓度为1g/L～50g/L，甘露醇的浓度为1g/L～15g/L，硝酸甘油的浓度为1g/L～20g/L。本发明的离体肺脏机械灌注液可在较长时间内保持离体肺功能稳定，并减轻肺水肿，进行肺修复，扩大了供肺的使用率，同时降低了白蛋白的使用量，大大降低了成本。

技术领域

本发明涉及器官保存技术领域，特别是涉及一种离体肺脏机械灌注液及其制备方法和应用。

背景技术

自肺脏移植技术(Lung Transplantations)开创以来，在过去的几十年里，临床肺脏移植已经取得了长足的发展和巨大的成功。肺脏移植是治疗终末期肺实质病和肺血管病的有效途径，肺脏移植的数量仍在每年快速增长。肺脏移植是终末期呼吸衰竭患者的终极解决方案，然而从已故捐赠者那里获得肺脏器官的比率比其他实体器官要低得多。可用于移植的肺脏的比例较低，这是由于供体肺在脑死亡、器官捐献过程中受到多种损伤机制(如呼吸机获得性肺炎、神经源性和静息性肺水肿、气压性创伤等)。因此，大部分供体肺脏没有被用于移植。虽然手术技术及围术期处理取得一些改进，然而缺血再灌注诱导的肺损伤(ischemia/reperfusion-induced lung injury)仍然是肺脏移植术后早期死亡的重要原因，主要表现特点为非特异性肺泡损伤、肺水肿及低氧血症。此外，严重的再灌注损伤增加供肺急性排斥反应的发生和长期的肺功能衰竭。而减轻缺血再灌注肺损伤与供肺保存效果正相关，故只有提高供肺的保存灌注技术，才可能更有效地利用每一个供肺，降低移植术后早期死亡率。与传统的静态冷保存相比，机械灌注能够更好地保存离体肺脏，甚至修复边缘供体肺脏器官，为解决肺脏短缺提供了新的思路，有望进一步扩展供肺的来源。20世纪90年代，肺脏机械灌注技术被用来研究肺生理。在肺移植领域，Steen等于2003年提出体外肺脏灌注(ex vivo lung perfusion,EVLP)，并在加拿大多伦多肺移植组得到了进一步改进。

目前肺脏移植中使用的灌注保存液主要为Steen液，价格昂贵，产品单一，且使用Steen液对肺进行机械灌注，最长只能维持12小时。这限制EVLP进行灌注修复的功能，例如针对细菌性肺炎，12个小时以内很难进行有效治疗。如果将EVLP维持时间进行延长，可以对边缘性供肺进行更好的评估及修复，例如一些基因治疗、干细胞疗法将可以应用于边缘性肺的修复，从而扩大供肺的使用率。

发明内容

基于此，有必要提供一种能够提高肺脏功能保持稳定的时长的离体肺脏机械灌注液。

一种离体肺脏机械灌注液，包括基础培养基、人血清白蛋白、聚蔗糖、右旋糖酐、甘露醇和硝酸甘油；所述离体肺脏机械灌注液中，所述人血清白蛋白的浓度为5g/L～20g/L，所述聚蔗糖的浓度为25g/L～70g/L，所述右旋糖酐的浓度为1g/L～50g/L，所述甘露醇的浓度为1g/L～15g/L，所述硝酸甘油的浓度为1g/L～20g/L。

在其中一个实施例中，所述离体肺脏机械灌注液中，所述人血清白蛋白的浓度为8g/L～15g/L，所述聚蔗糖的浓度为55g/L～65g/L，所述右旋糖酐的浓度为5g/L～15g/L，所述甘露醇的浓度为4g/L～10g/L，所述硝酸甘油的浓度为5g/L～15g/L。

在其中一个实施例中，所述离体肺脏机械灌注液中，所述人血清白蛋白的浓度为8g/L～12g/L，所述聚蔗糖的浓度为58g/L～62g/L，所述右旋糖酐的浓度为8g/L～12g/L，所述甘露醇的浓度为6g/L～8g/L，所述硝酸甘油的浓度为9g/L～11g/L。

在其中一个实施例中，所述基础培养基为DMEM培养基、F12培养基、RPMI-1640培养基和McCoy's 5A培养基中的一种或多种。