[发明专利]一种供玉米气生根显微结构观察的制片方法及其应用

说明书

一种供玉米气生根显微结构观察的制片方法及其应用，涉及一种玉米气生根的制片方法及其应用。是要解决现有的制片方法难以观察玉米气生根纵向的内皮层细胞性状及其排列的问题。方法：一、用水将玉米气生根上面附着的土壤冲掉；二、将气生根上的侧根切掉去除；三、将气生根用解剖刀切成根段；在根段侧面的表面自上而下划一个轴向的划口；四、用一只手的手指固定住根段的下半部分，另一只手的食指和拇指捏住根段进行揉捻；五、将位于根段外侧的薄壳撕下，剩下的是带有内皮层的中柱；六、在中柱外侧涂抹透明的指甲油，干后将透明胶带粘在涂抹指甲油的区域，取下，将带有指甲油的透明胶带平铺于载玻片上，供显微镜观察。本发明用于玉米气生根观察。

技术领域

本发明涉及一种玉米气生根的制片方法及其应用。

背景技术

玉米根系具有吸收水分和养分的功能，同时又具有固定和支撑地上部的作用，尤其是玉米较高茎节上着生的气生根，在玉米根系中占有重要地位。

玉米气生根呈圆柱状，玉米根的成熟区横切面解剖结构可以划分为表皮、皮层和中柱三大部分。皮层分为外皮层、中皮层和内皮层。其中外皮层由一至几层细胞组成，形状相对小些，排列紧密整齐；中皮层细胞层数较多，细胞较大，排列疏松，细胞间隙明显；皮层最内一层细胞是内皮层，排列整齐、紧密，成环，细胞的左右径向壁和上下横壁有局部栓质化的加厚带——凯氏带。内皮层的两侧分别是皮层和中柱，对皮层和中柱两侧组织之间的水分和溶质的交换起着非常重要的作用，调节水分和溶质在根中的运输。玉米支持根的外皮层具有细胞壁加厚的特征，而内皮层紧紧围绕在中柱鞘的外侧，在外皮层和内皮层之间的细胞排列疏松，有时形成通气组织。

玉米气生根内皮层在根系结构中占有重要位置，但由于其位于根系中间，大多数针对内皮层的结构观察都是采用横截面制片观察，但这种观察方法只能观察到横截面取样处的一层细胞。想进一步观察纵向的内皮层细胞性状及其排列，是存在困难的。

发明内容

本发明是要解决现有的制片方法难以观察玉米气生根纵向的内皮层细胞性状及其排列的问题，提供一种供玉米气生根显微结构观察的制片方法及其应用。

本发明供玉米气生根显微结构观察的制片方法，包括以下步骤：

一、取待观察的玉米气生根，用水将上面附着的土壤冲掉；

二、用解剖刀将气生根上的侧根切掉去除；

三、将去掉侧根的气生根用解剖刀切成根段，切割时解剖刀的刀刃与根段轴向垂直，使待观察气生根根段的两个断面平整；

用解剖刀在根段侧面的表面自上而下划一个轴向的划口，解剖刀切入根段侧面的深度要在皮层薄壁细胞的位置；

四、将根段呈竖直状态，用一只手的手指固定住根段的下半部分，另一只手的食指和拇指捏住根段的上部，进行揉捻，并逐渐下移，直至揉捻到根段的下部；

五、用镊子沿着划口，将位于根段外侧的薄壳撕下，剩下的是带有内皮层的中柱，即为待观察的中柱；

六、在待观察的中柱外侧涂抹透明的指甲油，待指甲油干后，将透明胶带粘在涂抹指甲油的区域，利用透明胶带将指甲油取下，将带有指甲油的透明胶带平铺于载玻片上，供显微镜观察。观察时，要将粘有指甲油的一面向下放置，使指甲油层位于载玻片和胶带之间。

进一步的，步骤三中根段的长度为1.5～3.0cm。

进一步的，步骤四中揉捻的具体方法为：用食指和拇指捏住根系的上部，推动食指，使根段在食指的带动下在拇指上旋转，然后松开食指；将拇指和食指下移，然后重复以上操作1～3次，直至根段的下部。

进一步的，步骤六中指甲油涂抹的厚度为100-600μm。

上述方法制得的片子用于在显微镜下进行玉米气生根成熟区内皮层细胞轴向形态的观察。

本发明的有益效果：