[发明专利]一种酶法制备5’-鸟苷酸的方法在审
| 申请号： | 201910801969.1 | 申请日： | 2019-08-28 |
| 公开（公告）号： | CN110551781A | 公开（公告）日： | 2019-12-10 |
| 发明（设计）人： | 张玲;夏海洋 | 申请（专利权）人： | 台州学院 |
| 主分类号： | C12P19/32 | 分类号： | C12P19/32;C12N9/16;C12N9/12;C12N15/55;C12N15/54 |
| 代理公司： | 33224 杭州天勤知识产权代理有限公司 | 代理人： | 韩聪 |
| 地址： | 318000 浙江*** | 国省代码： | 浙江;33 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 鸟苷酸 酸性磷酸 突变体 转移酶 制备 食品加工技术领域 磷酸转移酶活性 应用前景广阔 氨基酸序列 底物特异性 水解酶活性 催化反应 反应溶液 反应条件 分离纯化 焦磷酸钠 酶法制备 目标产物 混合液 纯酶 鸟苷 收率 催化剂 环保 | ||
1.氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的酸性磷酸转移酶突变体在催化鸟苷制备5’-鸟苷酸中的应用。
2.一种酶法制备5’-鸟苷酸的方法，其特征在于，包括：以氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的酸性磷酸转移酶突变体纯酶为催化剂，添加到含有鸟苷和焦磷酸钠的pH为3.6～9.0的反应溶液中，在25～60℃条件下进行催化反应，反应结束后，获得含5’-鸟苷酸的混合液，再经分离纯化获得5’-鸟苷酸。
3.如权利要求2所述的酶法制备5’-鸟苷酸的方法，其特征在于，在反应体系中，鸟苷的浓度为1～20mg/mL，焦磷酸钠的浓度为150～300mg/mL，酸性磷酸转移酶突变体纯酶的浓度为20～120μg/mL。
4.如权利要求2所述的酶法制备5’-鸟苷酸的方法，其特征在于，所述反应溶液中采用pH为3.6～5.8的乙酸钠缓冲液作为反应介质。
5.如权利要求4所述的酶法制备5’-鸟苷酸的方法，其特征在于，所述反应介质为pH为4.0的乙酸钠缓冲液。
6.如权利要求2所述的酶法制备5’-鸟苷酸的方法，其特征在于，催化反应的温度为25～40℃。
7.如权利要求6所述的酶法制备5’-鸟苷酸的方法，其特征在于，催化反应的温度为35℃。
8.如权利要求2所述的酶法制备5’-鸟苷酸的方法，其特征在于，催化反应的时间为6～8h。
9.如权利要求2所述的酶法制备5’-鸟苷酸的方法，其特征在于，所述酸性磷酸转移酶突变体纯酶的制备方法，包括：以含酸性磷酸转移酶突变体编码基因的重组大肠杆菌经培养至OD600＝0.6～0.8，加入终浓度为1mM的IPTG，25℃诱导10～12h，收集菌体，再经超声破碎获得细胞裂解液，离心取上清液，进一步分离纯化获得所述酸性磷酸转移酶突变体纯酶。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于台州学院，未经台州学院许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201910801969.1/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
