[发明专利]一种酿酒葡萄的组培快繁方法

权利要求书

1.一种酿酒葡萄的组培快繁方法，其特征在于，包括如下步骤：

取酿酒葡萄的休眠枝条，剪成单芽茎段，打破生理休眠，将单芽茎段水培至萌发，待新梢长度至10～20cm时采样，剪切为4～6cm的茎段，消毒，得到外植体；

剪切外植体的顶端和基部伤口，接种于启始培养基中进行启始培养；启始培养基为含有IBA 0.1～0.3mg/L、6-BA 0.5～1.5mg/L、KT 0.2～0.8mg/L、腺嘌呤2.0～6.0mg/L、蔗糖25～35g/L、琼脂8～9g/L的MS培养基；

待新梢长至5～6cm时，将新稍接种于增殖培养基中进行增殖培养，每40～50d继代一次，继代培养3～4代；增殖培养基为含有IBA0.1～0.3mg/L、蔗糖25～35g/L、琼脂6～7g/L的WPM培养基；

继代培养后，选取株高≥5cm、根系长度≥3cm、不定根≥3的组培苗进行炼苗、移栽。

2.根据权利要求1所述的组培快繁方法，其特征在于，所述单芽茎段的芽上端为平口，距芽2～3cm，下端为斜口，距芽3～4cm。

3.根据权利要求1所述的组培快繁方法，其特征在于，所述打破生理休眠的条件为：经44～46℃水浴处理85～95min。

4.根据权利要求1所述的组培快繁方法，其特征在于，所述水培为：利用泡沫板将单芽茎段漂浮在水中培养，3～4d换一次水，培养30～40d；水培的光强为30～40μmol·m^-2·s^-1，光照时间为14～16h，温度为25±2℃。

5.根据权利要求1所述的组培快繁方法，其特征在于，所述消毒的程序为：将茎段清洗干净，用75％乙醇浸泡30s，无菌水冲洗2～3次；再用质量体积百分浓度为0.3％～0.5％的次氯酸钠溶液浸泡15～20min，无菌水冲洗4～5次，去除茎段表面水分。

6.根据权利要求1所述的组培快繁方法，其特征在于，所述启始培养基为含有IBA0.2mg/L、6-BA 1.0mg/L、KT 0.5mg/L、腺嘌呤4.0mg/L、蔗糖30g/L、琼脂8.2g/L的MS培养基。

7.根据权利要求1所述的组培快繁方法，其特征在于，所述增殖培养基为含有IBA0.2mg/L、蔗糖30g/L、琼脂6.5～7g/L的WPM培养基。

8.根据权利要求1所述的组培快繁方法，其特征在于，所述启始培养的条件为光强30～40μmol·m^-2·s^-1、光照时间14～16h，温度为25±2℃；

所述增殖培养的条件为光强30～40μmol·m^-2·s^-1、光照时间14～16h，温度为25±2℃。

9.根据权利要求1所述的组培快繁方法，其特征在于，所述炼苗为：在温室条件下，将组培苗置于Hoagland半营养液中，覆膜培养6～8d，再用Hoagland全营养液培养6～8d，之后揭膜炼苗1～2周。

10.根据权利要求1至9中任一项所述的组培快繁方法，其特征在于，所述移栽为：炼苗后，将组培苗移栽在覆盖有棚膜的营养基质中，营养基质由园土、泥炭基质、蛭石组成，园土、泥炭基质、蛭石的体积比为1：1：1；逐步掀开棚膜，光照强度控制在90～180μmol·m^-2·s^-1，温度控制在20℃～28℃；移栽后第4周去掉棚膜，将组培苗定植于田间。