[发明专利]一种携载CCL2抗体的纳米石墨烯复合材料的构建方法

说明书

本发明提供一种携载CCL2抗体的纳米石墨烯复合材料的构建方法,包括如下步骤:(1)合成表面含有氨基功能团的C18‑PMH‑PEG‑NH₂纳米复合物；(2)采用RGO‑IONP与C18‑PMH‑PEG‑NH₂纳米复合物进行超声混合80～90min,得到表面含有氨基功能团的RGO‑IONP‑PEG‑NH₂纳米复合物；(3)将CCL2抗体与RGO‑IONP‑PEG‑NH₂纳米复合物加入至微波管中,避光超声混合20～25min,以纳米金属氧化物和二(2‑氯苯基)硼酸联合作为催化剂,置于微波辐射下催化反应,微波的温度为≤50℃,微波时间为15～20min,促使CCL2抗体与RGO‑IONP‑PEG‑NH₂纳米复合物反应连接,离心,收集上清液,采用超滤管去除未连接上的CCL2抗体,得到RGO‑IONP‑PEG‑CCL2纳米功能复合物。本发明的构建方法得到的RGO‑IONP‑PEG‑CCL2纳米功能复合物的产率提高,其反应温度低,反应条件温和,实现了纳米石墨烯复合材料对CCL2抗体的高负载率。

技术领域

本发明涉及生物医学复合材料技术领域，特别涉及一种携载CCL2抗体的纳米石墨烯复合材料的构建方法。

背景技术

纳米石墨烯是由单层碳原子形成的二维平面型材料，最近几年，基于纳米石墨烯的功能复合物在生物医学领域的应用引起广泛的关注，其可以作为各种生物分子载体进行生物检测、药物和基因输送。目前通过不断研究载体石墨烯的新的构建方法来获得不同的纳米石墨烯功能复合材料，对其进行功能化修饰，使之形成对药物、抗体及基因等体内输送的优良载体，从而运用于缺血性疾病及肿瘤中的靶向诊疗中。但由于载体石墨烯的构建方法不同，往往其对小分子药物、抗体及基因等负载率存在明显区别，进而影响到最终在体内药物治疗的效果。

目前，在研究如何突破以肿瘤相关中性粒细胞为主的免疫屏障，抑制其诱发的侵袭/转移级联机制，充分发挥沙门氏菌的抗肿瘤疗效的过程中，往往需要利用石墨烯进行功能化修饰，以达到高效携载CCL2抗体，用于干预肿瘤微环境中性粒细胞趋化因子CCL2，调控以中性粒细胞为主的免疫屏障。但在构建携载CCL2抗体的纳米石墨烯复合材料的过程中，现有的构建方法往往反应不充分，最终获得的纳米石墨烯复合材对CCL2抗体的负载率低，导致无法实现高效携载CCL2抗体的目的，因此，针对上述问题，提出一种新的高负载率且反应条件温和的携载CCL2抗体的纳米石墨烯复合材料的构建方法，为临床研究沙门氏菌肿瘤免疫疗法具有重要意义。

发明内容

鉴于此，本发明提出一种高负载率、反应条件温和的携载CCL2抗体的纳米石墨烯复合材料的构建方法。

本发明的技术方案是这样实现的：

本发明提供一种携载CCL2抗体的纳米石墨烯复合材料的构建方法，包括如下步骤：

(1)合成C18-PMH-PEG-NH₂

采用C18PMH、mPEG-NH₂和NH₂-PEG-BOC，合成表面含有氨基功能团的C18-PMH-PEG-NH₂纳米复合物；C18PMH为聚马来酸酐-C18烯；

(2)合成RGO-IONP-PEG-NH₂

采用RGO-IONP与步骤(1)得到的C18-PMH-PEG-NH₂纳米复合物，按照质量比为1：(10～15)进行超声混合80～90min，去除多余的C18-PMH-PEG-NH₂纳米复合物，得到表面含有氨基功能团的RGO-IONP-PEG-NH₂纳米复合物；RGO为还原石墨烯，IONP为四氧化三铁；

(3)合成RGO-IONP-PEG-CCL2纳米功能复合物