[发明专利]二甲双胍介导核酸纳米材料自组装方法及采用该方法制备的纳米制剂和应用

权利要求书

1.一种二甲双胍介导核酸纳米材料自组装的方法，其特征在于，所述方法包含：

1)取合成纳米材料所需的DNA冻干粉，分别加水稀释，混匀，测浓度，得到DNA溶液；

2)根据核酸组装所需的摩比取相应体的上述DNA溶液，在二甲双胍水溶液中以恒温退火、梯度退火以及慢退火方式诱导核酸纳米材料的自组装合成；

3)通过二甲双胍可介导的DNA模块设计和DNA折纸术设计的自组装，获得所述二甲双胍介导核酸纳米材料自组装结构；

所述二甲双胍介导的DNA模块设计的自组装通过二甲双胍介导由多条短于100碱基单链的DNA或RNA自组装DNA形成纳米结构，所述纳米结构包括DNA四面体和/或DNA纳米管。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤2)中：所述的恒温为22℃或37℃或45℃，所述恒温合成为，在恒温条件放置30～90分钟；

所述梯度退火合成为，95℃放置5分钟，65℃放置30分钟，50℃放置30分钟，37℃放置30分钟，22℃放置30分钟；

所述慢退火合成为，密封DNA溶液，放入100℃的水中缓慢降温，两天降至室温。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤2)所述二甲双胍水溶液的pH值为6.0-10 .0，并且所述二甲双胍水溶液的介导核酸 纳米材料自组装的浓度范围5μM-1000μM。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于：所述二甲双胍水溶液的介导核酸纳米材料自组装的浓度范围200μM-400μM。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤3)中：

所述二甲双胍介导的DNA折纸术设计的自组装为：二甲双胍介导利用折纸术设计的DNA结构自组装，包括DNA折纸术纳米棒和/或DNA折纸术四边形。

6.采用权利要求1-5任一所述方法制备的携带siRNA的DNA折纸术纳米棒的纳米制剂，其特征在于：所述的纳米材料由SEQ ID NO .8所述序列骨架链p3024，SEQ ID NO .9至SEQID NO .80所述订书针链1～72、SEQ ID NO .151所述Kras siRNA通过单链分子碱基互补配对合 成。

7.根据权利要求6所述的纳米制剂，其特征在于：SEQ ID NO .8所述序列骨架链p3024与 SEQ ID NO .9至SEQ ID NO .80所述订书针链1～72的摩尔比为1:8，DNA折纸术纳米棒与Kras siRNA的摩尔比为1:6。

8.权利要求6或7所述的纳米制剂的制备方法，其特征在于，包含步骤： 1)取订书针链1～72的冻干粉，分别加水稀释至100μM，取等体积混匀后得到订书针链 预混液溶液； 2)取骨架链p3024溶液和订书针链预混液按照1:2，1:4，1:6，1:8比例在二甲双胍溶液 中混合，DNA以恒温退火或梯度退火或慢退火方式合成；将Kras siRNA添加到纳米材料溶液中，再次放置30分钟，得到携带Kras siRNA的DNA折纸术纳米棒溶液。

9.权利要求6或7所述的纳米制剂在制备治疗肺癌的药物中的应用。

10.一种预防或治疗肺癌的制剂，其特征在于，该制剂的有效成分包含权利要求6-7中任一所述的携带siRNA的DNA折纸术纳米棒，及医用辅料。