[发明专利]一种p16免疫细胞化学标记显色试剂盒

说明书

本发明涉及生物科技技术领域，具体为一种p16免疫细胞化学标记显色试剂盒，检测试剂盒中包括以下试剂：0.5－1.0ml的p16免疫细胞标准品浓度为81pg/mL；1.5－2.0ml的标准品稀释液；2－4ml辣根过氧化物酶；2－4ml样品稀释液；2－4ml显色剂A液；2－4ml显色剂B液；2－4ml终止液；20ml×20倍的浓缩洗涤液。本发明用纯化的人p16抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入pl6，再与辣根过氧化物酶标记的p16抗体结合，形成抗体－抗原－酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加显色剂A底物显色。显色剂A和B在辣根过氧化物酶酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色，定位效果和显色效果好，标记更加明显，颜色的深浅和样品中的p16呈正相关，用酶标仪在450nm波长下测定吸光度。

技术领域

本发明涉及生物科技技术领域，具体为一种p16免疫细胞化学标记显色试剂盒。

背景技术

人类P16蛋白是细胞中的一种保护性蛋白，能够防止人体细胞癌变，起到阻止细胞过度增殖的作用。人类P16蛋白的编码基因为CDKN2A，位于9号染色体短臂上。P16蛋白能够与周期素依赖性激酶4结合并抑制其活性，使细胞停留于G1期，无法持续增殖。故而，P16是一种抑癌蛋白。细胞中，P16蛋白的表达通常受到另两种抑癌蛋白：P53和RB的调控，处于低水平状态。

目前市面上的p16免疫细胞化学标记显色试剂盒在实验时定位效果差，显色效果差，标记效果差。鉴于此，我们提供一种p16免疫细胞化学标记显色试剂盒。

发明内容

本发明的目的在于提供一种p16免疫细胞化学标记显色试剂盒，以解决上述背景技术中提出现如今p16免疫细胞化学标记显色试剂盒在实验时定位效果差，显色效果差，标记效果差的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

一种p16免疫细胞化学标记显色试剂盒，检测试剂盒中包括以下试剂：

0.5－1.0ml的p16免疫细胞标准品浓度为81pg/mL；

1.5－2.0ml的标准品稀释液；

2－4ml辣根过氧化物酶；

2－4ml样品稀释液；

2－4ml显色剂A液；

2－4ml显色剂B液；

2－4ml终止液；

20ml×20倍的浓缩洗涤液。

作为优选，p16免疫细胞标准品、标准品稀释液、辣根过氧化物酶、样品稀释液、显色剂A液、显色剂B液、终止液和浓缩洗涤液均在2－8℃的环境中进行保存。

作为优选，试剂盒从冷藏环境中取出后，在室温放置15－30min后再进行使用。

作为优选，检测试剂盒的实验使用步骤具体如下：

S1样本处理：将样本进行离心处理后，获取上清液；