[发明专利]基于自组装铁蛋白纳米抗原颗粒及由其制备的O型口蹄疫疫苗和应用有效
申请号: | 201910804606.3 | 申请日: | 2019-08-28 |
公开(公告)号: | CN112439056B | 公开(公告)日: | 2022-05-31 |
发明(设计)人: | 李轶女;张志芳;胡小元;刘兴健;易咏竹;张伟业 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院生物技术研究所 |
主分类号: | A61K39/135 | 分类号: | A61K39/135;A61P31/14;C07K19/00;C12N15/62 |
代理公司: | 北京思元知识产权代理事务所(普通合伙) 11598 | 代理人: | 余光军;曾晖 |
地址: | 100081 北京市海淀区中关*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 基于 组装 铁蛋白 纳米 抗原 颗粒 制备 口蹄疫 疫苗 应用 | ||
1.一种融合蛋白的同感序列的优化基因,所述融合蛋白由O型口蹄疫VP1结构蛋白和单体铁蛋白亚基连接得到;所述融合蛋白的同感序列的氨基酸序列为SEQ ID NO.1所示,融合蛋白的同感序列的编码基因的核苷酸序列为SEQ ID NO.2所示,其特征在于,所述优化基因的核苷酸序列为SEQ ID NO.3所示。
2.一种融合蛋白的同感序列的突变体,其特征在于,将SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列按照F35Y、V63E、N104I、P119R、Y131H或R180S中的任何一种氨基酸单位点突变方式获得的单位点突变体。
3.一种融合蛋白的同感序列的突变体,其特征在于,将SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列按照F35Y-V63E,N104I-P119R或P119R-Y131H中任何一种双位点突变方式获得的双位点突变体。
4.一种融合蛋白的同感序列的突变体,其特征在于,将SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列按照F35Y-V63E-N104I-P119R-Y131H-R180S进行多位点突变方式获得的多位点突变体。
5.权利要求1所述的优化基因在制备O型口蹄疫疫苗中的用途。
6.权利要求2-4任何一项所述的突变体在制备O型口蹄疫疫苗中的用途。
7.按照权利要求5所述的用途,其特征在于,包括:将权利要求1所述的优化基因在大肠杆菌原核表达系统中进行表达,收集并纯化所表达的抗原;
或者,将权利要求1所述的优化基因在家蚕表达系统或AcMNPV-昆虫细胞真核表达系统中进行表达,收集并纯化所表达的抗原;
或者,将权利要求1所述的优化基因克隆到杆状病毒哺乳动物的表达载体中得到重组杆状病毒;将重组杆状病毒在脊椎动物体内组织进行基因呈递产生抗原。
8.按照权利要求7所述的用途,其特征在于,将权利要求1所述的优化基因克隆到杆状病毒转移载体中构建得到重组转移载体;将重组转移载体与杆状病毒DNA共转染昆虫细胞,获得重组杆状病毒;将重组杆状病毒感染昆虫宿主或细胞,培养被感染的昆虫细胞或昆虫宿主表达相应的抗原,纯化,即得。
9.按照权利要求6所述的用途,其特征在于,包括:将权利要求2-4任何一项所述突变体的编码基因在大肠杆菌原核表达系统中进行表达,收集并纯化所表达的抗原;
或者,将权利要求2-4任何一项所述的突变体的编码基因在家蚕表达系统或AcMNPV-昆虫细胞真核表达系统中进行表达,收集并纯化所表达的抗原;
或者,将权利要求2-4任何一项所述的突变体的编码基因克隆到杆状病毒哺乳动物的表达载体中得到重组杆状病毒;将重组杆状病毒在脊椎动物体内组织进行基因呈递产生抗原。
10.按照权利要求9所述的用途,其特征在于,权利要求2-4任何一项所述突变体的编码基因克隆到杆状病毒转移载体中构建得到重组转移载体;将重组转移载体与杆状病毒DNA共转染昆虫细胞,获得重组杆状病毒;将重组杆状病毒感染昆虫宿主或细胞,培养被感染的昆虫细胞或昆虫宿主表达相应的抗原,纯化,即得。
11.一种O型口蹄疫疫苗,其特征在于,包含有效量的权利要求2-4任何一项所述的突变体和药学上可接受的佐剂或载体。
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