[发明专利]利用不同检测温度的靶核酸序列检测

权利要求书

1.一种利用不同检测温度及解链分析检测试样内2个靶核酸序列的方法，其特征在于，包括：

步骤(a)，在1个反应容器中与用于检测上述2个靶核酸序列的2个信号-产生机构一同培养上述试样，并利用单一类型的检测器检测所产生的信号，借助相应的信号-产生机构检测各个上述靶核酸序列，上述2个靶核酸序列的一个具有借助相应的信号-产生机构确定的相对较高检测温度，另一个具有借助相应的上述信号-产生机构确定的相对较低检测温度，上述相对较高检测温度为能够产生针对具有上述相对较高检测温度的靶核酸序列的信号的温度，上述相对较低检测温度为能够产生针对具有上述相对较低检测温度的靶核酸序列的信号以及具有上述相对较高检测温度的靶核酸序列的信号的温度，由上述2个信号-产生机构产生的信号不被上述单一类型的检测器区别，在上述相对较高检测温度下进行上述检测；

步骤(b)，为了确定具有上述相对较低检测温度的靶核酸序列的存在，在规定范围的温度下，进行对上述步骤(a)的培养结果物的解链分析；以及

步骤(c)，根据在上述步骤(a)中检测出的信号确定具有上述相对较高检测温度的靶核酸序列的存在，在上述步骤(b)中，利用解链分析结果确定具有相对较低检测温度的靶核酸序列的存在。

2.根据权利要求1所述的利用不同检测温度及解链分析检测试样内2个靶核酸序列的方法，其特征在于，针对各个上述靶核酸序列的信号-产生机构为以依赖于二聚物形成的方式产生信号的信号-产生机构。

3.根据权利要求1所述的利用不同检测温度及解链分析检测试样内2个靶核酸序列的方法，其特征在于，针对具有上述相对较高检测温度的靶核酸序列的信号-产生机构为基于检测寡核苷酸的切割的信号-产生机构，针对具有上述相对较低检测温度的靶核酸序列的信号-产生机构为基于二聚物形成的信号-产生机构。

4.根据权利要求1所述的利用不同检测温度及解链分析检测试样内2个靶核酸序列的方法，其特征在于，上述2个信号-产生机构包含相同的标记，从上述标记的信号不被单一类型的检测器区别。

5.一种利用检测温度及解链分析检测试样内至少3个靶核酸序列的方法，其特征在于，包括：

步骤(a)，在1个反应容器中与用于检测上述至少3个靶核酸序列的至少3个信号-产生机构一同培养上述试样，并利用单一类型的检测器检测所产生信号，借助相应的信号-产生机构分别检测上述至少3个靶核酸序列，上述至少3个靶核酸序列分别具有借助相应的上述信号-产生机构确定的不同检测温度，上述检测温度为不仅能够产生具有上述检测温度的靶核酸序列的信号且还能够产生针对具有高于上述检测温度的检测温度的靶核酸序列的信号的温度，由上述信号-产生机构产生的信号不被上述单一类型的检测器区别，通过检测温度分析检测上述至少3个靶核酸序列中的一部分靶核酸序列，在上述至少3个靶核酸序列中的上述一部分靶核酸序列的检测温度以及高于上述检测温度的1个以上的检测温度均进行上述检测；

步骤(b)，为了在上述至少3个靶核酸序列中确定除了上述一部分靶核酸序列之外的其他靶核酸序列的存在，在规定范围的温度下，对上述步骤(a)的培养结果物进行解链分析；以及

步骤(c)，(i)根据在上述步骤(a)中检测出的信号确定上述靶核酸序列中的上述一部分靶核酸序列的存在，当在上述至少3个靶核酸序列的上述一部分靶核酸序列中确定具有特定检测温度的靶核酸序列的存在时，则根据在高于上述特定检测温度的1个以上的检测温度下检测出的信号以及在上述特定检测温度下检测出的信号之间的差异确定具有上述特定检测温度的靶核酸序列的存在，在上述检测温度中上述特定检测温度为相对最高检测温度时，根据在上述特定检测温度下检测出的信号确定具有上述特定检测温度的靶核酸序列的存在，(ii)在上述步骤(b)中，根据解链分析的结果确定上述至少3个靶核酸序列中的除了上述一部分靶核酸序列之外的其他靶核酸序列的存在。

6.根据权利要求5所述的利用检测温度及解链分析检测试样内至少3个靶核酸序列的方法，其特征在于，首先确定具有相对最高检测温度的靶核酸序列的存在后，以按降序排列依次确定具有相对较低检测温度的靶核酸序列的存在的方式进行上述步骤(c)。