[发明专利]一种雄性毛白杨的组培方法

说明书

本发明公开了一种雄性毛白杨的组培方法，包括以下步骤：1)启动培养：选择半木质化嫩枝作为外植体，然后进行灭菌操作，接种于培养基中培养，直至获得无菌新芽；2)，继代增殖培养：选择生长良好的无菌芽，剪切为带芽茎段，转接至含有植物生长调节剂的培养基中进行继代增殖培养；3)生根培养：选取健壮的无菌芽，接种至添加生长素类似物的培养基中，直至生根；4)将生根的组培苗置于温室，进行两次炼苗，然后可进行大田移栽。本发明可以获得和母株遗传性一致的种苗，而且育苗周期短、节约繁殖材料，不受季节限制，更避免了其在无性繁殖过程中的繁殖材料老化现象，从而大大提高了毛白杨插、嫁接等成活率。

技术领域

本发明涉及林业种苗繁殖领域，尤其涉及一种雄性毛白杨的组培方法。

背景技术

雄性毛白杨(Populus tomentosa Carr.)杨柳科杨属落叶大乔木，高达30米。树皮有皮孔；树冠圆锥形至卵圆形或圆形。侧枝开展，雄株斜上，老树枝下垂；芽卵形，花芽卵圆形或近球形，微被毡毛。叶柄稍短于叶片，侧扁，先端无腺点。雄花序长10-14(20)cm，雌花序长4-7cm，果序长达14cm；蒴果圆锥形或长卵形，2瓣裂。花期3月，果期4月-5月。生长快，树干通直挺拔，适应性强，主根和侧根发达，枝叶茂密，是我国北方重要的绿化和造林树种，

毛白杨雌雄异株，单性花，葇荑花序，其雌株花序中小花发育成蒴果。成熟后，蒴果开裂，白色种毛携带着种子漫天飞舞，这是毛白杨有性繁殖的必经之路。而由于雌株产生杨絮所造成环境污染等问题，用雄株毛白杨代替雌株毛白杨的方式既可以从源头治理，可以最大程度发挥毛白杨的优势。

目前在繁育过程中多以无性繁殖为主，可用播种、扦插、埋条、留根、嫁接等，但无性繁殖材料往往存在老化现象，生产上多以苗繁苗导致苗木质量不高。树木的年龄效应和位置效应普遍存在，并对无性繁殖后代的生长发育产生显著影响。研究表明，组织培养是诱导再生的有效方法，也是繁殖材料幼化的有效途径。目前，对于三倍体毛白杨的组培技术研究已较成熟，不同毛白杨组织培养成活率差异较大，乡土雄株毛白杨组织培养目前研究较少，无性繁殖以嫁接和扦插为主，繁殖材料老化问题严重。因此，如何避免其在无性繁殖过程中的繁殖材料老化现象，从而提高无性繁殖的成活率，成为目前急需解决的问题。

发明内容

针对在现有技术中乡土毛白杨在无性繁殖过程中的繁殖材料老化的现状，尽可能的避免在无性繁殖过程中的树木的年龄效应和位置效应，从而提高无性繁殖的成活率，本发明提出了如下技术方案：

一种雄性毛白杨的组培方法，包括下述步骤：

步骤1，启动培养：选择半木质化嫩枝作为外植体，去除叶片及顶芽，切成带单芽茎段，用洗洁剂水浸泡并用毛笔轻刷，然后进行灭菌操作，接种于培养基中培养，直至获得无菌新芽；

步骤2，继代增殖培养：选择生长良好的无菌芽，剪切为带芽茎段，转接至含有植物生长调节剂的培养基中进行继代增殖培养；

步骤3，生根培养：选取健壮的无菌芽，接种至添加生长素类似物的培养基中，直至生根；

步骤4，将生根的组培苗置于温室，进行第一次炼苗，然后将组培苗取出，洗净根部琼脂，并移栽至盛满混合基质的营养杯或穴盘中，浇透并覆薄膜保湿；待苗木再次生根并长出幼嫩顶梢后，逐渐打开直至完全移除薄膜；当苗木进入快速生长期后，对组培苗进行第二次炼苗，然后可进行大田移栽。

优选地，所述步骤1中，单芽茎段的长度为1cm，且具有1-2个芽。

优选地，所述步骤1中，灭菌操作进一步为：在流水下冲洗1h，用75％的乙醇浸泡并轻摇30s，用无菌水冲洗3次，再转入0.1％升汞溶液中灭菌8-10min，最后使用无菌水冲洗5-7次。

优选地，所述步骤1中，进一步为，所述培养基为不添加任何激素的MS培养基；培养时间为两周；培养条件为温度25±2℃，光照12-24h·d^-1，光强1800-2500lx。