[发明专利]一种测定人体前白蛋白含量的磁微粒化学发光试剂盒及其制备方法

说明书

本发明公开了一种测定人体前白蛋白含量的磁微粒化学发光试剂盒及其制备方法。所述的试剂盒包括：用于人体前白蛋白测定的R1试剂、R2试剂、磁分离试剂、校准品液系列和化学发光底物液。本发明采用夹心法的反应模式，利用化学发光检测技术与磁微粒免疫分离技术相结合的原理，定量检测人血清样本中的人体前白蛋白含量，确保了检测的灵敏度，本试剂盒与传统试剂盒相比灵敏度高、无污染、特异性强、操作简单、并且对样品的前处理要求低、可快速高通量检测大批量样本，便于临床试剂应用。本发明为临床检测人血清中的人体前白蛋白提供了一种更准确、精确、方便、快捷和简便的方法。

技术领域

本发明涉及一种磁微粒化学发光检测试剂盒及其制备方法，特别涉及一种采用磁微粒化学发光技术和抗原-抗体结合技术检测人体前白蛋白含量的磁微粒化学发光检测试剂盒。本发明属于医用诊断试剂领域。

背景技术

前白蛋白(Prealbumin，PA)是由肝脏合成的一种分子量54980的富含色氨酸的血清负极性时相蛋白，又名甲状腺素转运蛋白。PA主要作用是参与甲状腺素的转运，同时作为视黄醇结合蛋白间接地转运维生素A，而且具有胸腺激素的活性，能通过促进淋巴细胞成熟的方式来增加人体免疫力。在清除有毒代谢产物的同时消耗自身，而且炎症越严重，血清PA消耗越多。在疾病发展的初期患者血清中PA浓度即可发生改变，随着疾病发展，人体营养状况的改变，血清PA浓度下降越明显，血清PA可逐渐成为反映人体营养不良状态的指标，可用于评估疾病的进展程度和严重程度。

PA的半衰期只有2.5天，相比于白蛋白(其平均半衰期为21天)要短暂的多，故在反应机体蛋白更新转换和评价人体营养状态的更为灵敏。营养不良早期，PA在血清中浓度已明显下降，因而能够敏感的反映人体蛋白质的更新转换及消耗情况。前白蛋白相比于白蛋白更早的受蛋白平衡的影响，对营养支持反应更迅速。有研究表明，前白蛋白可作为一个简单的评估患者蛋白质营养不良的指标，甚至对评估外科手术患者结局以及肿瘤的复发具有重要作用。

目前，前白蛋白在肝硬化、慢性活动性肝炎、阻塞性黄疸患者均显著降低，是早期肝功能损伤的指标。前白蛋白已经成为各种肝病、多种应激反应如感染、创伤、恶性肿瘤、甲状腺机能亢进及低下、肾脏疾病、家族性淀粉样变性多神经病(FAP)及营养不良等多种疾病的诊断、监测、预后判断及营养支持疗效评价等诸多方面均得到重视和应用。总之，前白蛋白作为临床上一项常用的营养指标，与很多疾病有着极为重要的关系。因此，开发前白蛋白诊断试剂盒具有重要的临床价值。

目前已知的前白蛋白检测方法主要有透射比浊法、免疫比浊法、免疫透射比浊法。但是，这些方法仍存在灵敏度底、线性范围窄、结果不稳定等缺陷。

因此，目前尚需一种灵敏度高、操作简单、自动化程度高、结果稳定、成本低廉的前白蛋白检测试剂盒和使用方法。

发明内容

本发明旨在开发一种灵敏度高、操作简单、自动化程度高、结果稳定、成本低廉的一种测定人体前白蛋白含量的磁微粒化学发光检测试剂盒。

基于上述目的，本发明提供一种测定人体前白蛋白含量的磁微粒化学发光检测试剂盒，包括：R1试剂、R2试剂、磁分离试剂、校准品液系列和化学发光底物液；

其中，R1试剂为异硫氰酸荧光素标记的抗人体前白蛋白单克隆抗体稀释液，R2试剂为碱性磷酸酶标记的抗人体前白蛋白抗体稀释液，磁分离试剂为抗异硫氰酸荧光素单克隆抗体包被的磁微粒稀释剂，校准品液系列为含有不同浓度人体前白蛋白的抗原稀释液，化学发光底物液为碱性磷酸酶催化发光的底物液。

其中，优选的，所述R1试剂是由缓冲液稀释而成的浓度为0.5～1.5μg/mL的异硫氰酸荧光素标记的抗人体前白蛋白单克隆抗体稀释液；

其中，优选的，用于制备R1试剂的缓冲液pH值为7.2～8.0，缓冲液包括浓度为12.0～12.3g/L的Tris、浓度为1.98～1.99g/L的叠氮钠、浓度为5.7～5.9g/L的氯化钠、浓度为5-20g/L的鱼皮明胶，其余为去离子水。