[发明专利]IFI44L基因和PI3基因在制备诊断细菌/病毒感染试剂盒中的用途在审
申请号: | 201910813525.X | 申请日: | 2019-08-30 |
公开(公告)号: | CN110387428A | 公开(公告)日: | 2019-10-29 |
发明(设计)人: | 王刚 | 申请(专利权)人: | 王刚 |
主分类号: | C12Q1/689 | 分类号: | C12Q1/689;C12Q1/70;C12Q1/6851;C12Q1/06 |
代理公司: | 济南金迪知识产权代理有限公司 37219 | 代理人: | 杨磊 |
地址: | 250014 山东*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 基因 病毒感染 试剂盒 诊断 聚合酶链式反应 细菌 细菌感染 制备 病毒感染疾病 感染性疾病 特征性变化 诊断试剂盒 内参基因 特异性强 早期诊断 缓冲液 扩增 引物 | ||
1.IFI44L基因和PI3基因在制备诊断细菌/病毒感染试剂盒中的用途,其特征在于,所述用途为IFI44L和PI3基因的检测试剂在制备诊断细菌/病毒感染试剂盒中的用途;所述试剂盒包含TaqMan聚合酶链式反应体系、用于扩增IFI44L基因和PI3基因以及内参基因的引物对和TaqMan荧光探针;所述TaqMan聚合酶链式反应体系包含qPCR缓冲液、dNTPs、Taq DNA聚合酶。
2.如权利要求1所述的IFI44L基因和PI3基因在制备诊断细菌/病毒感染试剂盒中的用途,其特征在于,所述用于扩增IFI44L基因的引物对核苷酸序列如下:正向引物序列5'-AATGGTACGGAAATATGGAGGG-3',反向引物序列5'-GAGATAAGTTGCCTTGATTCTGACA-3';所述用于扩增PI3基因的引物对核苷酸序列如下:正向引物序列5'-CAAAGGTCCAGTCTCCACTAAG-3',反向引物序列5'-GATTCCTGGGCAGTCAGTATC-3'。
3.如权利要求1所述的IFI44L基因和PI3基因在制备诊断细菌/病毒感染试剂盒中的用途,其特征在于,所述TaqMan荧光探针的核苷酸序列如下:IFI44L基因的TaqMan荧光探针序列5'-TCTCATTGCGGCACAC-3',PI3基因的TaqMan荧光探针序列5'-TATCTTGATCCGGTGCGCCATGTT-3',其中,IFI44L基因和PI3基因的TaqMan荧光探针5'端携带的荧光基团为VIC。
4.如权利要求1所述的IFI44L基因和PI3基因在制备诊断细菌/病毒感染试剂盒中的用途,其特征在于,所述内参基因为ACTB基因,用于扩增ACTB基因的引物对核苷酸序列如下:正向引物序列5'-TAGTTGCGTTACACCCTTTCTTG-3',反向引物序列5'-TCACCTTCACCGTTCCAGTTT-3';ACTB基因的TaqMan荧光探针序列为5'-ACCTAACTTGCGCAGAAAACAAGAT-3',其中,ACTB基因的TaqMan荧光探针5'端携带的荧光基团为FAM。
5.如权利要求1所述的IFI44L基因和PI3基因在制备诊断细菌/病毒感染试剂盒中的用途,其特征在于,所述试剂盒还包括M-MLV逆转录体系,所述逆转录体系包含:RandomPrimer p(dN)6、逆转录缓冲液、M-MLV逆转录酶、RNA酶抑制剂、dNTPs;优选的,所述逆转录反应液包含:250mM Tris-HCI(pH 8.3),375mM KCl,15mM MgCl2,50mM DTT。
6.一种诊断细菌/病毒感染的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包含TaqMan聚合酶链式反应体系、用于扩增IFI44L基因和PI3基因以及内参基因的引物对和TaqMan荧光探针;所述TaqMan聚合酶链式反应体系包含qPCR缓冲液、dNTPs、Taq DNA聚合酶。
7.如权利要求6所述的诊断细菌/病毒感染的试剂盒,其特征在于,所述用于扩增IFI44L基因的引物对核苷酸序列如下:正向引物序列5'-AATGGTACGGAAATATGGAGGG-3',反向引物序列5'-GAGATAAGTTGCCTTGATTCTGACA-3';所述用于扩增PI3基因的引物对核苷酸序列如下:正向引物序列5'-CAAAGGTCCAGTCTCCACTAAG-3',反向引物序列5'-GATTCCTGGGCAGTCAGTATC-3'。
8.如权利要求6所述的诊断细菌/病毒感染的试剂盒,其特征在于,所述TaqMan荧光探针的核苷酸序列如下:IFI44L基因的TaqMan荧光探针序列5'-TCTCATTGCGGCACAC-3',PI3基因的TaqMan荧光探针序列5'-TATCTTGATCCGGTGCGCCATGTT-3',其中,IFI44L基因和PI3基因的TaqMan荧光探针5'端携带的荧光基团为VIC。
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