[发明专利]一种郁金香花粉的采集、鉴定和保存方法以及郁金香杂交育种方法

说明书

本发明公开了一种郁金香花粉的采集、鉴定和保存方法以及郁金香杂交育种方法。一种郁金香花粉的采集、鉴定和保存方法，包括以下步骤：(1)花粉采集(2)对采集的花粉取样进行活力鉴定(3)选择萌发率大于5％、萌发速度大于5的花粉保存，保存温度为‑20℃～5℃。本发明郁金香花粉的采集、鉴定和保存方法通过快速活力鉴定，挑选活力较好的花粉进行保存，低温进行保存，保存时间长，花粉能长时间保持活力，有效解决郁金香杂交育种的花期不遇问题，为亲本选择提供科学依据。

技术领域

本发明涉及花粉采集及保存技术领域，特别是涉及一种郁金香花粉的采集、鉴定和保存方法以及郁金香杂交育种方法。

背景技术

郁金香(Tulipa gesneriana L.)是百合科郁金香属的多年生草本植物，具鳞茎。郁金香原产地中海沿岸及中亚细亚、土耳其等地。由于地中海的气候，形成郁金香适应冬季湿冷和夏季干热的特点，具有夏季休眠、秋冬生根并萌发新芽但不出土，需经冬季低温后第二年2月上旬左右(温度在5℃以上)开始伸展生长形成茎叶，3～4月开花的特性。生长开花适温为15～20℃。花芽分化是在茎叶变黄时将鳞茎从盆内掘起放阴冷的室外内度夏的贮藏期间进行的。分化适温为20～25℃，最高不得超过28℃。

大多数郁金香品种自交不亲和，必须人工采集花粉进行杂交。当前国际上育成的郁金香新品种中，大部分采用的是常规杂交授粉方法。花粉活力是亲本选择的一个重要参考标准，杂交之前，鉴定花粉活力可以协助亲本选择，提高杂交授粉成功率。

郁金香花期不遇问题：郁金香花期短，单朵花期在10天左右，群体在20-30天。不同品种的郁金香花期相差更大。在我国不同区域郁金香开放时期差异很大，从南到北依次推迟。例如浙江台州地区春节期间既开放，江苏南京阳春三月开放，大连英歌石植物园的郁金香四月开放，而新疆昭苏地区五月绽放。

常温状态下郁金香花粉活力迅速下降，多数品种花粉在花药开裂后10天便失去活力。

因此，在郁金香杂交育种过程中，花期不遇和花粉贮藏期短是亟待解决的问题。研究适宜郁金香花粉的采集方法、活力鉴定方法、贮藏条件，为解决郁金香杂交育种的花期不遇和亲本选择提供科学依据。

公开号为CN104322216A的发明专利申请公开了一种郁金香花粉采集和贮藏的方法，其特点是：在上午选择含苞待放的大蕾期花苞，用手轻轻拨开花瓣，用镊子采集花药，花药采集后放入适当大小塑料培养皿中，培养皿上盖标明花粉采集日期、品种信息；再将采集好的花粉连同培养皿一起带回室内，放入密闭玻璃箱中，玻璃箱底部放入干燥剂，干燥剂上方设置网状隔板，将装有花粉的培养皿放在网状隔板上，经24小时后，脱水完成；最后将脱水后的花粉取出，将培养皿上盖扣好放回干燥箱内，然后密封玻璃干燥箱，在室温无阳光直射的条件下贮藏备用。该技术方案在一定程度上解决了郁金香杂交育种过程中，花粉采集和贮藏的部分问题，然而还是存在一些问题，比如花粉采集选择含苞待放、花粉未散开的花朵，此时花粉活力是不是最大有待验证，默认收集的花粉都是合格的，而没有在收集保存之前进行萌发率的鉴定，而现有技术中对郁金香花粉萌发率鉴定所需时间较长，在这个过程中可能会影响花粉质量；并且该技术方案花粉最多贮藏30天，在一些情况下，这个贮藏时间还是较短。

发明内容

本发明针对现有郁金香杂交育种技术中存在的不足，提供了一种郁金香花粉的采集、鉴定和保存方法以及郁金香杂交育种方法。

一种郁金香花粉的采集、鉴定和保存方法，包括以下步骤：

(1)花粉采集

(2)对采集的花粉取样进行活力鉴定

取花粉样品均匀涂在培养基上，在光照培养箱中培养，培养后计算花粉萌发率和萌发速度，以花粉管长度超过花粉粒直径作为萌发标准，萌发率＝已萌发花粉粒数/花粉粒总数×100％；用花粉管长度与花粉粒直径的比值反映萌发速度，萌发速度＝花粉管长度/花粉粒直径；