[发明专利]一种从菠萝蜜种子中提取蛋白的方法

权利要求书

1.一种从菠萝蜜种子中提取蛋白的方法，其特征在于，包括以下步骤：

A)将菠萝蜜种子预处理，得到种子粉；

B)将种子粉脱脂、用碱提取，超声、离心，得到上清液和沉淀；沉淀用碱复提一次，合并上清液，备用，得到的沉淀用酸中和，洗涤后，离心得到沉淀物；所述用碱提取为用NaHCO₃提取；所述NaHCO₃的浓度为1mol/L；所述NaHCO₃溶液与菠萝蜜种子的质量比为10:1；所述超声采用数控超声波清洗器，功率为200～500w，时间20～50min；

C)将上清液采用酸调节pH值至4.3，放置、离心、溶解、洗涤、冻干得到碱溶蛋白；

将沉淀物配制成悬浊液，采用α-淀粉酶酶解，接着加入淀粉葡萄糖苷酶酶解，最后加入β-1,3,4-葡聚糖酶酶解，而后将悬浊液离心、清洗、冻干得到碱不溶蛋白。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述预处理具体为：采用水洗去菠萝蜜种子外层的果胶，然后磨粉、风干、过筛；所述磨粉为用粉碎机细化处理2min～10min。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤B)所述脱脂为采用正己烷脱脂；所述种子粉和正己烷的质量体积比为1g/5～8mL。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤C)所述酸为HAc；所述酸浓度为1mol/L；所述放置具体为4℃放置1h；所述溶解为用蒸馏水溶解调pH至7。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，每1g沉淀物加入α-淀粉酶的酶活力为10000～12000U/g；每1g种子粉加入淀粉葡萄糖苷酶的酶活力为600～800U/g；每1g种子粉加入β-1,3,4-葡聚糖酶的酶活力为6～10U/g。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤C)所述α-淀粉酶酶解温度为60℃～70℃；所述酶解时间为1～2h；所述淀粉葡萄糖苷酶酶解温度为35℃～45℃；所述酶解时间为14～18h；所述β-1,3,4-葡聚糖酶酶解温度为35℃～38℃；所述酶解时间为1～1.5h。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤C)所述悬浊液离心转速为4000rpm～5000rpm，离心时间为20～30min。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤C)所述悬浊液离心后冻干具体为在-80℃将蛋白沉淀干燥至水分质量百分含量为4～6％。