[发明专利]一种培养基质及使用其繁殖中华桫椤方法

权利要求书

1.一种培养基质，其特征在于：培养基质由煤烟灰和培养液润湿的腐殖土组成；所述的煤烟灰质量为培养液润湿的腐殖土的质量的2％-5％。

2.根据权利要求1所述的一种培养基质，其特征在于：所述的润湿腐殖土的培养液中的大量元素与微量元素的含量为MS培养液的1/8-1/1，铁盐与有机成分的含量与MS培养液相同，pH为5.5-6.0。

3.根据权利要求1所述的一种培养基质，其特征在于：所述的培养液与腐殖土的质量比为1:(5-20)。

4.根据权利要求1所述的一种培养基质，其特征在于：所述的煤烟灰刮取自距离地面10m以上的烧煤烟筒的内壁，并使用网孔直径为0.2mm-0.5mm的筛子筛取。

5.一种如权利要求1至4中任一项所述的培养基质的制备方法，其特征在于：该方法是通过下述操作完成的：培养盘在125℃下高压蒸汽灭菌20min后，将厚度为5mm的海绵铺于培养盘中；在海绵上铺厚为2cm-3cm的腐殖土，压平、压实；使用培养液润湿腐殖土，并混入煤烟灰；最后，将培养盘置于灭菌锅中，125℃灭菌20min。

6.根据权利要求5所述的培养基质的制备方法，其特征在于：所述的腐殖土润湿前，使用网孔直径为2mm的筛子筛取细土，并晾晒在阳光直射的室外平台上。

7.一种使用如权利要求1至4中任一项所述的培养基质繁殖中华桫椤的方法，其特征在于：该方法通过下述操作完成的：首先，对中华桫椤的孢子消毒并制成无菌孢子悬浊液；然后接种在培养基质中进行培养至幼孢子体苗高为2cm-3cm。

8.根据权利要求7所述的培养基质繁殖中华桫椤的方法，其特征在于：所述的中华桫椤的孢子消毒并制成无菌孢子悬浊液过程为：取中华桫椤孢子置于1.5ml的离心管内，滴入无菌水，充分震荡，使用转速4000r/min离心1min，静置后弃上清液；然后向离心管内滴入1.2ml的5g/100ml的NaC₁₀溶液消毒处理4min，使用转速4000r/min离心1min，静置后弃上清液；使用无菌水清洗3-4次，得到无菌孢子悬浊液。

9.根据权利要求8所述的培养基质繁殖中华桫椤的方法，其特征在于：所述的中华桫椤孢子的接种的过程为：取0.1ml的无菌孢子悬浊液，加入无菌水稀释10倍，均匀的接种在培养基质中。

10.根据权利要求8所述的培养基质繁殖中华桫椤的方法，其特征在于：所述的中华桫椤孢子的培养条件为：接种后，置于温度20℃-30℃，暗培养12h后转至光照下继续培养，光照强度为3000-4000Lux，光照时间为12h/d，空气相对湿度为75％，培养至幼孢子体苗高为2cm-3cm。