[发明专利]一种五倍子药材的UPLC指纹图谱的构建方法、通过该方法构建的指纹图谱及其应用

权利要求书

1.一种五倍子药材的超高效液相色谱指纹图谱的构建方法，其包括下列步骤：

1)制备五倍子药材的多个供试品溶液以及指标性成分的对照品溶液；所述指标性成分为没食子酸、没食子酸甲酯、五没食子酸酰基葡萄糖；所述供试品溶液的制备包括取五倍子药材，加甲醇提取；

2)将步骤1)中制备的供试品溶液以及对照品溶液分别进行超高效液相色谱分析，得到相应的超高效液相色谱图；测定多批五倍子药材，并进行分析比较，得到其共有峰的超高效液相色谱指纹图谱；

所述超高效液相色谱分析的条件如下：采用Water ACQUITY BEH Shield RP18色谱柱,粒径为1.7μm；以甲醇为流动相A，以0.05体积％-0.2体积％磷酸水溶液为流动相B，进行梯度洗脱；检测波长为273nm或280nm；所述梯度洗脱的程序如下：

0min→15min→20min→25min→35min→45min→55min→56min，流动相A：10％→30％→31％→33％→38％→45％→63％→10％。

2.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于：

所述方法还包括步骤3)采用液质联用技术，按照步骤2)的超高效液相色谱条件，采集质谱数据，对其共有峰进行归属。

3.根据权利要求1或2所述的构建方法，其特征在于：

步骤1)供试品溶液的制备中提取时间为15-60min。

4.根据权利要求1或2所述的构建方法，其特征在于：步骤1)供试品溶液的制备中提取方式为超声处理或振摇提取或加热回流。

5.根据权利要求1或2所述的构建方法，其特征在于：

所述流动相B选自0.1体积％磷酸水溶液。

6.根据权利要求1或2所述的构建方法，其特征在于：

所述超高效液相色谱分析的条件还包括柱温为20-30℃；流速为0.25-0.35ml/min。

7.根据权利要求1或2所述的构建方法，其特征在于：

步骤1)制备肚倍药材的多个供试品溶液，步骤2)得到的包含14个共有峰的超高效液相色谱指纹图谱，以峰2没食子酸为参照峰，各峰相对保留时间应在规定值的±5％之内，各峰的规定值分别为：峰1:0.67、峰2：1.00、峰3：2.42、峰4：3.54、峰5：4.37、峰6：5.17、峰7：5.52、峰8：6.84、峰9：7.69、峰10：8.35、峰11：10.28、峰12：10.78、峰13：11.61、峰14：14.29。

8.根据权利要求7所述的构建方法，其特征在于：

所述14个共有峰中，峰2为没食子酸、峰3为没食子酸甲酯、峰14为五没食子酸酰基葡萄糖。

9.根据权利要求1或2任一项所述的构建方法，其特征在于：

步骤1)制备角倍药材的多个供试品溶液，步骤2)得到的包含10个共有峰的超高效液相色谱指纹图谱，以峰2没食子酸为参照峰，各峰相对保留时间应在规定值的±5％之内，各峰的规定值分别为：峰1:0.66、峰2：1.00、峰3：2.34、峰4：3.43、峰5：5.00、峰6：5.29、峰7：6.55、峰8：7.95、峰9：9.69、峰10：13.52。

10.根据权利要求9所述的构建方法，其特征在于：所述10个共有峰中，峰2为没食子酸、峰3为没食子酸甲酯，峰10为五没食子酸酰基葡萄糖。

11.根据权利要求1～10任一项所述的构建方法获得的五倍子药材的超高效液相色谱指纹图谱在五倍子药材以及含五倍子药材的制剂的检测中的应用。

12.根据权利要求11所述的应用 ，其特征在于，对于17批肚倍药材进行检测，相似度在0.940以上；对于7批角肚药材进行检测，相似度在0.920以上。