[发明专利]玉米赤霉烯酮水解酶突变体ZHDM1及其编码基因和应用

说明书

本发明属于农业生物技术领域，具体涉及玉米赤霉烯酮水解酶突变体ZHDM1及其编码基因和应用。玉米赤霉烯酮水解酶突变体ZHDM1，通过将野生型玉米赤霉烯酮水解酶ZH607的第136‑142位氨基酸突变得到。本发明的玉米赤霉烯酮水解酶突变体ZHDM1的酶活力是野生型的2.9倍，因此，本发明高酶活力突变体能够满足能源、食品和饲料等领域中对于玉米赤霉烯酮降解活性的要求，具有广阔的应用前景。

技术领域

本发明属于农业生物技术领域，具体涉及玉米赤霉烯酮水解酶突变体ZHDM1及其编码基因和应用。

背景技术

玉米赤霉烯酮(zearalenone,ZEN)又被称为F-2毒素，它是由多种镰刀菌属产生的非甾体、具有类雌激素性质的霉菌毒素。ZEN的雌激素效应毒性不仅仅表现在损害雌性动物生殖能力，而且能引起雄性动物生殖系统的损害。此外，高剂量ZEN还具有肝肾毒性、肠道毒性、免疫毒性及其霉菌毒素的联合毒性，严重危害动物健康。

微生物降解法消除ZEN污染是利用微生物在代谢过程中产生的酶与ZEN作用，破坏ZEN分子的毒性基团，使其被降解或转化为无毒产物的过程。生物降解法降解ZEN专一性强、ZEN分子被转化效率高、不会引起环境污染，并且能够保留饲料原有营养价值。但目前所发现的玉米赤霉烯酮水解酶活性均较低，阻碍了玉米赤霉烯酮水解酶的大规模工业化生产及应用。

发明内容

本发明的目的在于提供一种玉米赤霉烯酮水解酶突变体ZHDM1。

本发明的再一目的在于提供上述突变体的编码基因。

本发明的再一目的在于提供含有上述编码基因的重组表达载体。

本发明的再一目的在于提供含有上述编码基因的重组菌株。

本发明的再一目的在于提供上述玉米赤霉烯酮水解酶突变体ZHDM1的制备方法。

本发明的再一目的在于提供上述玉米赤霉烯酮水解酶突变体ZHDM1的应用。

根据本发明的具体实施方式，所述玉米赤霉烯酮水解酶突变体ZHDM1通过将野生型玉米赤霉烯酮水解酶ZH607的第136-142位氨基酸由ASVTGME突变为DILLHIH得到，其中，野生型玉米赤霉烯酮水解酶ZH607的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示：

MSTTRATKTVTTKDGIKWHVEQEGNGPDIVLVPDGLGECQMFDKPMSIIAASGFRVTTFDMPGMSRSRDAPPETYRDVTGHKLAGYVDTLLEELKIPIASVWGCSSGATTVLALCAAFPERVRNAMPHELPTVNPASVTGMEEKDPAVISQEMAAVSRSISGGTEAWDALGPEVHARLHDNYVRWARGYPVTIPPSAPTKSEVLHKRPVDWTVGGGTPTAMFFDNIVIAVKEGLNIGLLPGGHFPYVSHPEAFAEYVVETCRKYI

玉米赤霉烯酮水解酶突变体ZHDM1的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示：

MSTTRATKTVTTKDGIKWHVEQEGNGPDIVLVPDGLGECQMFDKPMSIIAASGFRVTTFDMPGMSRSRDAPPETYRDVTGHKLAGYVDTLLEELKIPIASVWGCSSGATTVLALCAAFPERVRNAMPHELPTVNPDILLHIHEKDPAVISQEMAAVSRSISGGTEAWDALGPEVHARLHDNYVRWARGYPVTIPPSAPTKSEVLHKRPVDWTVGGGTPTAMFFDNIVIAVKEGLNIGLLPGGHFPYVSHPEAFAEYVVETCRKYI

玉米赤霉烯酮水解酶突变体ZHDM1编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示：