[发明专利]一种富含多酚的防城金花茶愈伤组织获取方法

权利要求书

1.一种富含多酚的防城金花茶愈伤组织获取方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤一：愈伤诱导；作业时，以防城金花茶幼嫩叶片为外植体，经消毒处理后，接种于诱导培养基上培养，得到愈伤组织；

步骤二：继代培养，将诱导出来的愈伤组织从叶片上分离，接种至诱导培养基中，每30d继代一次，一共继代3次及以上；

步骤三：将继代培养的愈伤组织接种至附加处理培养基，持续培养35-45d，得到富含多酚的防城金花茶愈伤组织活体。

2.根据权利要求1所述的富含多酚的防城金花茶愈伤组织获取方法，其特征在于，所述外植体原料需要在植株上选取2cm宽、4-6cm长的红色幼嫩叶片。

3.根据权利要求2所述的富含多酚的防城金花茶愈伤组织获取方法，其特征在于，所述消毒处理安装如下流程依次进行：1）将完整叶片放置与消毒器皿中，2）使用流水冲洗30分钟；3）采用75%酒精浸泡30S；4）采用1000 mg/L爱立克浸泡20min；5）采用无菌水反复冲洗5遍。

4.根据权利要求3所述的富含多酚的防城金花茶愈伤组织获取方法，其特征在于，所述外植体按照以下方法进行切取，取消毒好的叶片中间带叶脉部分，切去边缘与两端多余部分，切成长宽约1cm的方块，一个叶片取三块。

5.根据权利要求1-4任一所述的富含多酚的防城金花茶愈伤组织获取方法，其特征在于，步骤一中所述的的诱导培养基为附加5.0 mg/L 6-BA、0.1mg/L 2,4-D的MS；诱导时间为45d；光照条件为24h/d黑暗。

6.根据权利要求1-4任一所述的富含多酚的防城金花茶愈伤组织获取方法，其特征在于，步骤二中继代培养基为附加5.0 mg/L 6-BA、0.1mg/L 2,4-D的MS；继代周期为30d、光照条件为24h/d黑暗。

7.根据权利要求1-4任一所述的富含多酚的防城金花茶愈伤组织获取方法，其特征在于，步骤三中继代培养基为为附加2.5-7.5mg/L 6-BA、0.05-0.1mg/L 2,4-D及5-50 mg/L苯丙氨酸的MS；处理时间为35-45d；光照条件为12h/d光照+12h/d黑暗。