[发明专利]一种秃疮花中木兰花碱的提取分离方法

权利要求书

1.一种秃疮花中木兰花碱的提取分离方法，其特征在于，包括以下步骤：

A、秃疮花全草药材干燥粉碎，取其干粉，用乙醇溶液超声波提取3-4次，温度为42-48℃，每次45-75min，过滤，合并滤液，60-70℃减压回收溶剂，制得乙醇提取物；

B、充分混悬后，再依次用极性由小到大的不同溶剂萃取：首先用等量石油醚溶剂连续萃取3-4次，混合萃取液，并减压蒸馏除去石油醚溶剂，得石油醚萃取相浸膏；剩余水相，加入1.5-2.5％盐酸进行酸化，并调节至pH为1-2，然后用等量氯仿溶剂萃取3-4次，合并萃取液，并减压除去氯仿溶剂，得酸化氯仿相浸膏；将剩余酸水溶液用20-30％氨水碱化，调至pH为9-10，再用等量氯仿溶剂萃取，合并氯仿萃取液，得碱化氯仿相；余下碱水溶液再用等量的正丁醇溶剂萃取3次，再次合并萃取液，并减压除去正丁醇溶剂，得正丁醇相浸膏；

C、取正丁醇相浸膏，干法上样，硅胶柱层析，依次用洗脱剂CHCl₃:CH₃OH＝6：1、4：1、1：1、1：2的比例梯度洗脱，TCL检测，碘化铋钾试剂检测生物碱，分得原阿片碱、小檗碱、木兰花碱、黄连碱。

2.如权利要求1所述的秃疮花中木兰花碱的提取分离方法，其特征在于，所述的步骤A中，所述的乙醇溶液为体积分数为95％的乙醇溶液。

3.如权利要求1所述的秃疮花中木兰花碱的提取分离方法，其特征在于，所述的步骤A中，所述的乙醇溶液的质量为药材的4-6倍量，即在常压下固液比(g/mL)为1：(4-6)。

4.如权利要求1所述的秃疮花中木兰花碱的提取分离方法，其特征在于，包括以下步骤：

A、秃疮花全草药材干燥粉碎，取其干粉400g，用95％乙醇溶液2000mL超声波提取3次，温度为45℃，每次60min，过滤，合并滤液，65℃减压回收溶剂，制得乙醇提取物；

B、充分混悬后，再依次用极性由小到大的不同溶剂萃取：首先用等量石油醚溶剂连续萃取3次，混合萃取液，并减压蒸馏除去石油醚溶剂，得石油醚萃取相浸膏；剩余水相，加入2.0％盐酸进行酸化，并调节至pH为1.5，然后用等量氯仿溶剂萃取3次，合并萃取液，并减压除去氯仿溶剂，得酸化氯仿相浸膏；将剩余酸水溶液用25％氨水碱化，调至pH为9.4，再用等量氯仿溶剂萃取，合并氯仿萃取液，得碱化氯仿相；余下碱水溶液再用等量的正丁醇溶剂萃取3次，再次合并萃取液，并减压除去正丁醇溶剂，得正丁醇相浸膏；

C、取正丁醇相浸膏，干法上样，硅胶柱层析，依次用洗脱剂CHCl₃:CH₃OH＝6：1、4：1、1：1、1：2的比例梯度洗脱，TCL检测，碘化铋钾试剂检测生物碱，分得原阿片碱、小檗碱、木兰花碱、黄连碱；

所述的步骤A中，所述的乙醇溶液的质量为药材的5倍量，即在常压下固液比(g/mL)为1：5。

5.如权利要求1-4任一所述的木兰花碱的应用，其特征在于，所述的木兰花碱作为制备植物抗菌药物的应用。

6.如权利要求5所述的木兰花碱的应用，其特征在于，木兰花碱对小麦赤霉、马铃薯干腐、番茄早疫和小麦赤霉病原菌具有显著的抑制活性。

7.如权利要求6所述的木兰花碱的应用，其特征在于，木兰花碱对小麦赤霉、马铃薯干腐、番茄早疫3种植物病原真菌的抑菌率超过90％，对小麦赤霉病原菌的抑菌率达到100％。