[发明专利]一种硫酸庆大霉素注射液无菌检查方法

说明书

本发明公开一种硫酸庆大霉素注射液无菌检查方法，采用薄膜过滤法，培养物的制备步骤包括，利用二联封闭薄膜过滤器进行薄膜过滤,缓冲液冲洗的量为每膜100‑800mL，培养基的加入量为每膜100mL；检验组制备步骤包括，硫酸庆大霉素注射液加入到稀释液中稀释，稀释液的体积为注射液体积的0‑10倍；注射液过滤的量为每膜过滤效价为80万单位；阳性对照组制备步骤包括，采用大肠埃希菌作为阳性对照菌，阳性对照菌在加入培养基后加入。本发明提供的硫酸庆大霉素注射液无菌检查方法，针对硫酸庆大霉素抑菌特性，调整无菌检查过程、培养基、缓冲液等要素，能够准确可靠的对硫酸庆大霉素注射液进行无菌检查。

技术领域

本发明涉及药品检测领域，特别涉及一种硫酸庆大霉素注射液无菌检查方法。

背景技术

硫酸庆大霉素为氨基糖苷类抗生素，对各种革兰阴性细菌及革兰阳性细菌都有良好抗菌作用，作用机制是与细菌核糖体亚单位结合，抑制细菌蛋白质的合成。硫酸庆大霉素适用于治疗革兰氏阴性菌所致的严重感染，例如败血症、下呼吸道感染、肠路感染等。硫酸庆大霉素注射液卫生指标要求为无菌，在生产过程中，虽然经过灭菌，但也可能存在部分低活或休眠状态微生物未被杀灭或除去。

无菌检查法是对无菌药品等的无菌可靠性建立的检查方法，方法是否准确对药品安全控制非常重要。《中国药典》规定对注射液需进行无菌检查，《中国药典》2015年版对无菌检查方法作了具体要求，但硫酸庆大霉素注射液对细菌有明显的抑制作用，影响无菌检查的可靠性，需要通过进行无菌检查方法学适用性研究，消除药品抑菌作用。对于具有抑菌性的注射液，一般选用薄膜过滤法进行无菌检查，进行多次方法学适用性试验，通过对药品稀释、对薄膜进行冲洗等消除抑菌性，确定最终无菌检查方法，但确定的无菌检查方法冲洗液的量不能过大，大量的冲洗液对薄膜进行冲洗，可能会造成假阴性结果，检验不准确。需要确定一种准确的硫酸庆大霉素注射液无菌检查方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种硫酸庆大霉素注射液无菌检查方法，针对硫酸庆大霉素抑菌特性，调整无菌检查过程、培养基、缓冲液等要素，能够准确可靠的对硫酸庆大霉素注射液进行无菌检查。

为实现上述目的，本发明提供一种硫酸庆大霉素注射液无菌检查方法，采用薄膜过滤法，培养物包括检验组、阳性对照组、阴性对照组，

每组培养物的制备步骤包括，利用二联封闭薄膜过滤器进行薄膜过滤,缓冲液冲洗的量为每膜100-800mL，培养基的加入量为每膜100mL；

检验组制备步骤包括，硫酸庆大霉素注射液加入到稀释液中稀释，稀释液的体积为硫酸庆大霉素注射液体积的0-10倍；硫酸庆大霉素注射液过滤的量为80万单位过滤效价；

阳性对照组制备步骤包括，采用大肠埃希菌作为阳性对照菌，阳性对照菌在加入培养基后加入；

其中，

稀释液为pH7.0的氯化钠-蛋白胨缓冲液或0.9％的无菌氯化钠溶液；缓冲液为pH7.0的氯化钠-蛋白胨缓冲液；培养基包括硫乙醇酸盐流体培养基或胰酪大豆胨液体培养基中的一种。

采用上述方案，由于硫酸庆大霉素具有抑菌作用，通过对注射液原液加入稀释液进行稀释，以及薄膜过滤后通过缓冲液多次冲洗实现降低抑菌作用，准确进行无菌检查。发明人通过参照《中国药典》2015版无菌检查法，对硫酸庆大霉素注射液无菌检查方法适用性研究，多次进行方法适用性试验，确定了上述硫酸庆大霉素注射液进行无菌检查过程中，注射液原液不稀释，或进行稀释的范围，适合的薄膜过滤器，薄膜过滤后冲洗的量；确定大肠埃希菌是硫酸庆大霉素的敏感菌，适于作为阳性对照菌。无菌检查操作过程为防止污染，一般要求无菌过程和有菌过程应分开进行，本发明阳性对照菌是在加入培养基后加入，使无菌操作过程和有菌操作过程分开，防止污染发生。

根据本发明的另一具体实施方式，本发明的实施方式公开的硫酸庆大霉素注射液无菌检查方法，缓冲液冲洗的量为每膜300mL；硫酸庆大霉素注射液加入到稀释液中稀释，稀释液的体积为硫酸庆大霉素注射液体积的10倍。