[发明专利]一种抗猫细小病毒猫源化基因工程抗体ELISA试剂盒及其检测方法

说明书

本发明公开了一种抗猫细小病毒猫源化基因工程抗体ELISA试剂盒及其检测方法，属于基因工程抗体分析检测技术领域，该试剂盒包括包被有抗原的酶标板和酶标抗体；所述抗原为FPV‑VLPS纯化抗原，所述酶标抗体为辣根过氧化物酶标记的山羊抗猫IgG抗体。该检测方法包括：包被酶标板，绘制标准曲线，加入辣根过氧化物酶标记的山羊抗猫IgG抗体，TMB显示，终止液终止，测定反应各孔OD₄₅₀值，根据判定标准进行判断等步骤。本发明提供的试剂盒及其检测方法对抗猫细小病毒猫源化基因工程抗体的检测具有非常高的敏感性、特异性及稳定性，为检测紧急免疫前后的动物体内抗猫细小病毒猫源化基因工程抗体水平的研究提供有力支持。

技术领域

本发明涉及基因工程抗体分析检测技术领域，尤其涉及一种抗猫细小病毒猫源化基因工程抗体ELISA试剂盒及其检测方法。

背景技术

猫细小病毒(Feline parvovirus，FPV)，又名猫泛白细胞减少症病毒、猫传染性肠炎病毒或猫瘟病毒。猫细小病毒是细小病毒科、细小病毒属成员。猫细小病毒能在猫及猫科动物脾、心、肾、肺、肠、睾丸、骨骼、肾上腺和淋巴结等多种组织细胞中复制增殖，猫细小病毒主要感染猫及猫科动物(如虎、豹)及鼬科动物(貂、雪貂)、浣熊科(长吻浣熊、浣熊)动物。可感染各种年龄的猫，主要引起1岁以下的幼猫发病。其中又以3月龄至5月龄未经预防接种的幼猫易感，感染率可达70％，病死率为50％～60％，最高可达80％-90％，通常表现为整窝小猫同时发病或者先后陆续发病。猫细小病毒感染的几率随易感动物年龄增长发病率逐渐降低，但成年猫也可能发生隐性感染。幼猫通过初乳获得的免疫保护通常可达3个月。病猫与康复带毒猫是主要传染源。妊娠母猫受到病毒感染后能以垂直传播方式将染病毒传给胎儿，造成死胎、木乃伊胎、畸形胎等。

目前针对猫细小病毒的预防主要是疫苗免疫，有效的疫苗接种和彻底的消毒对预防多猫家庭和动物收容所的疾病传播至关重要。最常见的有灭活疫苗和减毒活疫苗，灭活疫苗安全性高，但总体上弱毒疫苗在控制疾病扩散方面比灭活疫苗效果好。在一些欧洲国家已有商品化的马源抗体制剂，可以预防幼猫及成年猫免受FPV感染。但如果使用马源抗体，易导致致命的过敏反应。抗猫细小基因工程抗体与FPV良好的结合,同时与马源抗体相比更接近天然猫源抗体降低了异源性,进而使其更能发挥效果。

申请号(201910535002.3)专利申请提供了一种抗猫细小病毒的猫源化基因工程抗体，有望应用于感染猫细小病毒猫的治疗。因此，检测抗猫细小病毒猫源化基因工程抗体水平的研究对保护猫有着重要的应用价值。目前市售的拜奥高猫三联抗体试剂盒并未提及可以检测抗猫细小病毒基因工程抗体，针对其检测范围不能适用猫细小病毒基因工程抗体，本申请专门设计的一种能够抗猫细小病毒基因工程抗体的检测方法以及试剂盒，旨在检测紧急免疫前后的动物体内抗猫细小病毒基因工程抗体水平，评估它们的免疫机能，分析动物免疫效果，判断免疫是否成功，使病程达到可控的效果，对疾病的诊断与预后提供帮助。

发明内容

本发明的目的是针对猫细小病毒基因工程抗体，提供一种抗猫细小病毒猫源化基因工程抗体ELISA试剂盒及一种抗猫细小病毒猫源化基因工程抗体ELISA检测方法，为检测紧急免疫前后的动物体内抗猫细小病毒猫源化基因工程抗体水平的研究提供有力支持。

为了实现上述目的，本发明提供的技术方案如下：

本发明首先提供了一种抗猫细小病毒猫源化基因工程抗体ELISA试剂盒，所述试剂盒包括包被有抗原的酶标板和酶标抗体，所述抗原为FPV-VLPs(FPV的病毒样颗粒)纯化抗原，所述酶标抗体为辣根过氧化物酶标记的山羊抗猫IgG抗体。

优选地，上述的抗猫细小病毒猫源化基因工程抗体ELISA试剂盒中，所述FPV-VLPs纯化抗原的工作浓度为2μg/mL。

优选地，上述的抗猫细小病毒猫源化基因工程抗体ELISA试剂盒中，所述酶标抗体的稀释倍数为1:6000。