[发明专利]一种异戊烯基化黄酮类化合物及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种异戊烯基化黄酮类化合物的制备方法，其特征在于，所述的异戊烯基化黄酮类化合物是从小叶莲中提取的桃儿七酮V，即sinoflavonoid V，Ⅰ；桃儿七酮W，即sinoflavonoid W，Ⅱ；桃儿七酮X，即sinoflavonoid X，Ⅲ；桃儿七酮Y，即sinoflavonoidY，Ⅳ；桃儿七酮Z，即sinoflavonoid Z，Ⅴ；桃儿七酮NA，即sinoflavonoid NA，Ⅵ，分子结构式分别为：

制备方法是，以小叶莲药材6-9kg为原料，用2-5倍原料重量、体积浓度为75％-95％的乙醇加热回流提取3次，提取温度为90-95℃，每次提取时间为1.5-2小时，合并三次提取液，减压回收乙醇得浸膏状乙醇提取物，混悬于2-3.2L的蒸馏水中，依次以石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇各萃取3次，每次2-3.2L，时间为1.5-2小时；将乙酸乙酯萃取部位经硅胶柱色谱分离，依次用体积比为100:0、100:5、100:7、100:10、100:30、100:50、100:70、100:100、100:200、0:100的石油醚-丙酮混合溶剂进行梯度洗脱，每一梯度用9.1-13L洗脱液，流速为10-15mL/min，每350-500mL为一流份，收集260个流份，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，用GF254薄层板，分别以体积比1:1的石油醚-丙酮和体积比5:1的二氯甲烷-甲醇作为展开剂，以体积比10:90的硫酸-乙醇溶液作为显色剂，105℃加热3-5min，根据薄层色谱检测结果，分别合并流份1-35、流份36-85、流份86-104、流份105-115、流份116-132、流份133-144、流份145-157、流份158-163、流份164-170、流份171-182、流份183-188、流份189-195、流份196-204、流份205-208、流份209-234、流份235-260，得到组份Fr.1-Fr.16；将组分Fr.7经开放ODS柱色谱，依次以体积比60:40、70:30、80:20、90:10的甲醇-水混合溶剂梯度洗脱，每一梯度400-600mL，每40-60mL为一流份，共收集40个流份，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，用GF254薄层板，分别以体积比2:3的石油醚-丙酮作为展开剂，以体积比10:90的硫酸-乙醇溶液作为显色剂，105℃加热3-5min，根据薄层色谱检测结果，分别合并流份1-7、流份8-14、流份16-25、流份26-32、流份33-36、流份37-40，得到6个亚组份Fr.7-1、Fr.7-2、Fr.7-3、Fr.7-4、Fr.7-5、Fr.7-6；亚组份Fr.7-4经硅胶柱色谱，体积比100:10、100:30、100:50石油醚-丙酮混合溶剂洗脱，每一梯度40-70mL，每4-7mL为一流份，收集含有目标化合物Ⅵ的流份得到化合物Ⅵ；

将组分Fr.8经Sephadex LH-20凝胶柱色谱，甲醇洗脱，流速为50-70mL/h，每8-12mL为一流份、收集43个流份，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，用GF254薄层板，以体积比5:3的二氯甲烷-丙酮作为展开剂，以体积比10:90的硫酸-乙醇溶液作为显色剂，105℃加热3-5min，根据薄层色谱检测结果，分别合并流份4-7、流份8-13、流份9-26、流份27-33、流份34-43，得到5个亚组份Fr.8-1、Fr.8-2、Fr.8-3、Fr.8-4、Fr.8-5；亚组份Fr.8-4经制备型高效液相色谱纯化，色谱柱为YMC-Pack ODS-A，再以体积比为72:28的甲醇-水混合溶液洗脱，流速为7mL/min，收集保留时间为25min的色谱峰得到化合物Ⅳ；

将组分Fr.9经硅胶柱色谱，以体积比100:30的石油醚-丙酮溶液洗脱，每10-15mL为一流份，收集含有化合物Ⅴ的流份即得到化合物Ⅴ；

将组分Fr.12经开放ODS柱色谱，经体积比50:50、70:30、80:20的甲醇-水溶液梯度洗脱，每一梯度150-200mL，每15-20mL为一流份，共收集30个流份，分别合并流份1-9、流份10-18、流份19-30，得到3个亚组份Fr.12-1、Fr.12-2、Fr.12-3；亚组份Fr.12-3经制备型高效液相色谱纯化，色谱柱为YMC-Pack ODS-A，再以体积比为60:40的甲醇-水混合溶液洗脱，流速为7mL/min，收集保留时间为40min的色谱峰得到化合物Ⅰ；

将组分Fr.14经Sephadex LH-20柱色谱，经甲醇洗脱，流速为30-50mL/h，每3-5mL为一流份、收集25个流份，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，用GF254薄层板，以体积比2:3的石油醚-乙酸乙酯作为展开剂，以体积比10:90的硫酸-乙醇溶液作为显色剂，105℃加热3-5min，根据薄层色谱检测结果，分别合并流份3-11、流份12-17、流份18-25，得到3个亚组份Fr.14-1、Fr.14-2、Fr.14-3；亚组份Fr.14-3经制备型高效液相色谱纯化，色谱柱为YMCPackODS-A，再以体积比为75:25的甲醇-水混合溶液洗脱，流速为7mL/min，收集保留时间为16min的色谱峰得到化合物Ⅲ，收集保留时间为25min的色谱峰得到化合物Ⅱ。