[发明专利]一种褐藻胶裂解酶

说明书

本发明提供一种褐藻胶裂解酶，该褐藻胶裂解酶的氨基酸序列为SEQ ID NO:1。本发明所提供的褐藻胶裂解酶酶可用于催化海藻酸钠产生不饱和2‑8糖，主要产物为不饱和二糖，经制备可得不饱和二糖和不饱和三糖。

技术领域

本发明属于功能酶筛选技术领域，具体涉及一种PL-6家族褐藻胶裂解酶ScCD6酶学性质表征及产物分析。

背景技术

褐藻是三大藻类之一，主要成分为褐藻胶、甘露醇和海带多糖。其中，甘露醇和海带多糖的利用的相关研究较为成熟，因此，如何高效降解褐藻胶并实现工业化应用是目前研究的热点。褐藻胶是由β-D-甘露糖醛酸(M)和α-L-古罗糖醛酸(G)构成的线性多糖，其降解产物褐藻寡糖具有重要的生理活性，如抗氧化、抗肿瘤、促进植物根细胞生长等，因此受到了广泛的关注。

褐藻胶裂解酶(Aly)可以通过β-消除反应机制来降解褐藻胶，并且在降解产物的非还原端形成不饱和的碳碳双键，由此于紫外235nm下产生特殊吸收峰，可用来进行产物检测。根据Aly的底物特异性，可将其分为poly M，poly G和双功能型的褐藻胶裂解酶；根据其酶切方式，可将其分为内切型(endo-type)和外切型(exo-type)褐藻胶裂解酶，内切型Aly降解褐藻胶的终产物为褐藻寡糖(AOs)，常见产物聚合度为2-6，而外切型Aly的产物单一，终产物为单糖，但也有二糖为最小酶切单元的报道；根据CAZY数据库的分类，褐藻胶裂解酶属于多糖裂解酶(PL)，并具体分为PL-5，PL-6，PL-7，PL-14，PL-15，PL-17和PL-18七个家族。

目前，制备褐藻寡糖的方法主要是酸解等化学法，制备条件剧烈且容易造成环境污染，而相比之下，生物法降解褐藻多糖条件温和、易于控制并且绿色环保，因此开发高效、稳定性高且易于制备的褐藻胶裂解酶是十分必要的。

发明内容

本发明提供一种PL-6褐藻胶裂解酶ScCD6,并应用该酶降解海藻酸钠产生褐藻寡糖。

本发明首先提供一种褐藻胶裂解酶，其氨基酸序列SEQ ID NO:1如下：MNRPRLSTYAAITVAAITIAALTTAASALASTGDTSSRTPSGNSTPQANATIVNVSSSTQLTTAMANAVAGQTIVLANGSYSIGKLNAKNGTSSAPITIMAAQQGKAIITGGQLEVLSSSYVTFSGLKWTNSNTLKITSSHHIRLTRNHFRLTESSSLKWIIIQGANSHHNRIDHNLFEEKHQLGNFITIDGSSTQQSQYDLIDYNHFRNIGPRATNEMEAIRVGWSAISKSDGFTTVENNLFENCDGDPEIVSVKSNANTVRYNTFRTSQGSVSLRHGNRSQVHGNFFFGGGKTGTGGVRVYGQDHKIYNNHFEGLTGTGYDAALQLDGGDVDTSGALSSHWRVYRATAVHNTFVNNVSNIEIGANYSLAPVDSLVADNIVVGSSGKLFNELKMPKNMTYAGNIGWPTGSATIGITTGVRTVNPLLAKQGEVYRLGTGSPAVNTASGSYSFLADDMDGQSRSGTADVGADELSTGTVVHKPLNSADVGISAP；