[发明专利]一种黄鳝精子高效使用方法

权利要求书

1.一种黄鳝精子高效使用方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤1. 配置精子保存液并进行冷冻保存；

步骤2. 取预冷精子保存液，将公黄鳝精液加入预冷精子保存液中，得到精子混合液，精子混合液的总体积为M毫升；步骤2具体为：步骤2.取精子保存液，将黄鳝精子加入精子保存液中，得到总体积为M毫升的精子混合液；

步骤3. 吸取P微升精子混合液放置在载玻片上，吸取纯净水对精子混合液进行稀释混匀，利用显微镜检查精子活力和密度，计算精子混合液的可配置的黄鳝卵数量，所述M=10000P；

步骤3具体为：吸取P微升精子混合液放置在载玻片上，吸取5P微升纯净水对精子混合液进行稀释混匀，利用显微镜观察精子混合液中的精子活力，随机选择显微镜视野中任一点作为观察点，确定观察点附近的精子游动情况，若此观察点附近游动精子超过3个，则再向载玻片上的精子混合液中加入5P微升纯净水进行稀释，稀释后继续观察原观察点，若3秒内有超过3个精子经过此观察点附近，则继续向载玻片上的精子混合液中加入5P微升纯净水进行稀释，直到观察到3秒钟之内有3个精子经过此观察点附近，则停止稀释，稀释过程中添加的纯净水总量的两倍即为原M毫升精子混合液的配卵碗数，例如，若稀释过程中共添加了N微升纯净水，则原M毫升精子混合液的配卵碗数为N×2碗，每碗包括黄鳝卵400-600粒；

步骤4.根据可配置的黄鳝卵数量对精子混合液进行稀释并保存。

2.根据权利要求1所述的黄鳝精子高效使用方法，其特征在于，所述精子保存液中包括无水氯化钙、氯化钠、氯化钾、葡萄糖和碳酸氢钠，所述无水氯化钙的浓度为1g/L，氯化钠的浓度为9g/L，氯化钾的浓度为0.3g/L，葡萄糖的浓度为1.5g/L，碳酸氢钠的浓度为0.4g/L。

3.根据权利要求1所述的黄鳝精子高效使用方法，其特征在于，步骤4中，若可配置的黄鳝卵数量为N×2碗，则将10毫升精子混合液稀释为N×2毫升，稀释后的每毫升精子混合液可配置一碗黄鳝卵。