[发明专利]大麻全草提取物在改善tau蛋白和β-淀粉样蛋白病理损伤中应用

说明书

本发明公开了一种大麻全草提取物的应用，其特征是一种大麻全草提取物可以同时有效的降低抑制tau蛋白和β‑淀粉样蛋白病理损伤，大麻全草提取物通过抑制tau蛋白聚集和tau蛋白磷酸化程度两个途径减轻tau蛋白的病理损伤，通过抑制淀粉蛋白沉积β‑淀粉样蛋白病理损伤。本发明提供了一种tau蛋白和β‑淀粉样蛋白有效的病理损伤的抑制剂，可以用于科研临床方面作为实验的标准品。

技术领域

本发明属于改善蛋白的病理损伤技术领域，具体涉及一种改善tau蛋白和β-淀粉样蛋白的病理损伤的分子领域。

背景技术

微管系统是细胞骨架成分，可参与细胞功能。Tau蛋白是含量最高的微管相关蛋白之一。正常Tau蛋白的细胞功能是参与形成的微管，维持微管稳定性，降低微管解离，并诱导成束。正常人中由于Tau蛋白mRNA剪辑方式不同，可形成6种蛋白异构体。Tau蛋白为含磷酸基蛋白，有多个可以磷酸化的的氨基，但是正常Tau蛋白分子含2～3个磷酸基。Tau蛋白异常折叠错误和不当磷酸化，可以导致蛋白质功能紊乱，从而导致的病理改变，甚至是疾病的发生。

β淀粉样蛋白( amyloid-β，Aβ)是含有 39～43个氨基酸的多肽。多与伴侣蛋白结合，少数以游离状态。人体Aβ最常见的亚型是Aβ40 和 Aβ42。在人脑脊液和血中，容易聚集引发神经毒性作用。

大麻全草提取物（CBDV）是工业大麻中主要的无精神活性成分，现在在医学上也发现多种功能。

发明内容

本发明的目的在于提供一种改善tau蛋白和β-淀粉样蛋白病理损伤的物质。

本发明的目的是这样实现的，包括大麻全草提取物，用于改善tau蛋白的病理损伤，特别是改善人类tau蛋白的病理损伤，其通过抑制tau蛋白聚集特别是抑制humantau311蛋白聚集，或者通过抑制tau蛋白磷酸化的水平，抑制位点是tau蛋白396位点和tau蛋白231位点和tau蛋白199位点。大麻全草提取物，用于改善人类β-淀粉样蛋白的病理损伤通过减轻了Aβ淀粉蛋白沉积。特别是Aβ42淀粉蛋白沉积。

本发明优点是大麻全草提取物是大麻中众多成分的一种，毒性低，不具有成瘾性，可以长时间服用，大麻全草提取物易于大规模生产，其可以减轻tau蛋白的病理损伤，通过抑制tau蛋白聚集和磷酸化实现和改善人类β-淀粉样蛋白的病理损伤。

附图说明

图1为大麻全草提取物（CBDV）抑制了Aβ聚集实验。

图2为大麻全草提取物（CBDV）抑制了tau 蛋白聚集和磷酸化的实验。

具体实施方式

β-淀粉样蛋白（β-amyloid protein，Aβ）沉积及细胞内过度磷酸化的tau 蛋白（P-tau）聚集形成的神经纤维缠结（neurofibrillary tangles，NFT）是重要的病理特征[1]。在体外研究方面，我们采用负染投射电镜实验观察大麻全草提取物TCE（Cannabis Extract）对Aβ42（Sigma，USA）聚集及tau Ac-306VQIVYK311 (成都凯捷生物医药科技发展有限公司提供)聚集后的螺旋丝状物的干扰效果[2, 3] 。此外，采用南京大学-南京生物医药研究院购置的APP/PS1转基因小鼠进行体内研究，在小鼠三月龄时，分别设立对照组和大麻提取物治疗组（每组均为12只动物，雌雄各半），大麻提取物治疗组给药剂量为100mg/kg, 持续9个月，然后进行心脏灌注，取大脑进行研究。

Aβ 解聚分析,Aβ42肽购于Sigma公司，单体的前期处理即分装按Dahlgren论文中描述的方法进行 [4]。将20μg Aβ42单体工作液（Sigma，USA）溶解在DMEM培养基中，在37 °C培养箱中孵育 7天形成Aβ原纤维，然后加入20 mg/mL大麻全草提取物（TCE）共同孵育3天，在透射电子显微镜（Hitachi7650）下观察并拍照。