[发明专利]一种哲罗鲑三倍体苗种的制备方法

权利要求书

1.一种哲罗鲑三倍体苗种的制备方法，其特征在于，包括：

三倍体热休克诱导的步骤，包括在二倍体受精卵受精后15min，将该受精卵放入17℃水浴中过渡1min；然后放入26-27℃水浴中热处理15min；再放入17℃水浴中过渡1min；以及

受精卵孵化的步骤，包括将经所述三倍体热休克诱导的受精卵置于7-9℃孵化水温的容器中进行孵化。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述三倍体热休克诱导的步骤包括在二倍体受精卵受精后15min，将该受精卵放入17℃水浴中过渡1min；然后放入26.5℃水浴中热处理15min；再放入17℃水浴中过渡1min；或者，

所述三倍体热休克诱导的步骤包括在二倍体受精卵受精后15min，将该受精卵放入17℃水浴中过渡1min；然后放入26℃水浴中热处理15min；再放入17℃水浴中过渡1min；或者，

所述三倍体热休克诱导的步骤包括在二倍体受精卵受精后15min，将该受精卵放入17℃水浴中过渡1min；然后放入27℃水浴中热处理15min；再放入17℃水浴中过渡1min。

3.根据权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，还包括在受精后2h剔除死卵，然后再进行孵化。

4.根据权利要求1-3任一项所述的制备方法，其特征在于，还包括亲鱼培育的步骤；其中，所述培育的水温要求在14～17℃，水中溶解氧要求在6mg/L以上，每天按1.5％投饵率投喂鲑鳟鱼亲鱼专用饲料，每10天按5％～8％投饵率投喂一次鲜活鱼饵；冬季在2-4℃水温条件下越冬至少60天以上，越冬期间每两天按0.3％投饵率投喂亲鱼饲料，每10天按5％投饵率投喂一次鲜活鱼饵；春季水温升到6～7℃，水中溶解氧要求在8mg/L以上，每天按0.5％投饵率投喂亲鱼饲料，每天按3％～5％投饵率投喂一次鲜活鱼饵，进行产卵前的强化培育；和/或，

所述亲鱼年龄：雌鱼6⁺龄以上，雄鱼5⁺龄以上；所述亲鱼规格：雄亲鱼3000g以上，雌亲鱼3500g以上；雌雄鱼数量配比1:1。

5.根据权利要求1-4任一项所述的制备方法，其特征在于，还包括获得二倍体受精卵的步骤；

其中，人工催产所用催产剂为鱼用促排卵素2号(LHRH-A₂)和马来酸地欧酮(DOM)，采用胸鳍基部2次注射法，第1次注射时间为产前1个月、水温6℃、雌鱼注射LHRH-A₂，剂量1ug/kg；第2次注射，雌鱼LHRH-A₂ 5ug/kg+DOM 5mg/kg；雄鱼剂量减半；和/或，

采卵时用0.03％乙二醇苯醚麻醉亲鱼以减少应激反应；和/或，

采卵后用漏网滤掉体腔液，受精时1尾雌鱼卵用3尾雄鱼精液干法受精。

6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，在所述获得二倍体受精卵的步骤中还包括将哲罗鲑精液置于0.6％NaCl稀释液中在室温下暂时保存。

7.根据权利要求1-6任一项所述的制备方法，其特征在于，所述受精卵孵化的步骤采用孵化桶+平列槽结合的受精卵孵化方法，受精卵发眼前用孵化桶孵化，发眼后移入到平列槽。

8.根据权利要求1-7任一项所述的制备方法，其特征在于，所述受精卵孵化的步骤中孵化期控制水温7-10℃，溶解氧＞6mg/L；和/或，

发眼前每周用50ppm甲醛流水消毒1h；和/或，

整个孵化期积温需要260-280度·日，孵化期大约30-40天。