[发明专利]一种固态酶型时间-温度指示剂及其制备方法在审
| 申请号： | 201910833694.X | 申请日： | 2019-09-04 |
| 公开（公告）号： | CN110617899A | 公开（公告）日： | 2019-12-27 |
| 发明（设计）人： | 张岩;王麟;王保营;周龙杰;李瑞瑞;李周;王倩 | 申请（专利权）人： | 河南牧业经济学院 |
| 主分类号： | G01K11/12 | 分类号： | G01K11/12;G01N21/78 |
| 代理公司： | 41109 郑州中原专利事务所有限公司 | 代理人： | 王晓丽 |
| 地址： | 450000 河南省郑州*** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 凝胶片 愈创木酚 虫漆酶 包埋 温度指示剂 固态酶 淀粉酶 脂肪酶 絮状 酶生物活性 食品新鲜度 体系混合 效果稳定 颜色分布 活化能 颜色块 指示剂 底物 贴合 团状 脲酶 泄露 扩散 阻碍 制作 | ||
1.一种固态酶型时间-温度指示剂，其特征在于：由虫漆酶PVA凝胶片和愈创木酚PVA凝胶片两部分构成，使用时两部分贴合构成固态酶型时间-温度指示剂，其中虫漆酶PVA凝胶片是包埋虫漆酶的PVA凝胶片，愈创木酚PVA凝胶片是包埋愈创木酚的PVA凝胶片。
2.根据权利要求1所述的固态酶型时间-温度指示剂，其特征在于：所述虫漆酶PVA凝胶片由以下原料制备而得，浓度为0.1g/mL PVA水溶液， pH值为5.0的缓冲溶液；虫漆酶；稳定剂；每1mL缓冲溶液加入0.010g -0.029g虫漆酶得虫漆酶缓冲溶液；每1mL虫漆酶缓冲溶液中添加0.001g稳定剂混合均匀，加入稳定剂的虫漆酶缓冲溶液离心取上清液，每1mL上清液加入6mLPVA水溶液得浓度为1.5-4.0mg/mL的虫漆酶PVA溶液，磁力搅拌，放入模具，制成包埋虫漆酶的PVA凝胶片。
3.根据权利要求2所述的固态酶型时间-温度指示剂，其特征在于：所述缓冲溶液是由浓度为0.004g/mL的醋酸钠水溶液，再缓慢加入稀释的醋酸水溶液得到pH值为5的缓冲溶液，稳定剂是牛血清白蛋白。
4.根据权利要求2或3所述的固态酶型时间-温度指示剂，其特征在于：所述虫漆酶溶液放入模具后，通过反复冻融制得虫漆酶PVA凝胶片。
5.根据权利要求4所述的固态酶型时间-温度指示剂，其特征在于：所述愈创木酚PVA凝胶片由以下步骤制备而得，40mL PVA水溶液中加入 0.1488-0.2976g愈创木酚， 得浓度为30-60mM的愈创木酚PVA混合溶液，磁力搅拌，倒入模具，冻融制得包埋愈创木酚的PVA凝胶片。
6.根据权利要求5所述的固态酶型时间-温度指示剂，其特征在于：所述愈创木酚PVA混合溶液合倒入模具后经过4次冻融，冷冻温度为-16℃，每次冷冻时间为6小时，融化温度为25℃，融化时间为2小时。
7.一种固态酶型时间-温度指示剂的制作方法，其特征在于：具体步骤如下：
A．虫漆酶PVA凝胶片的制备
1.PVA水溶液的配制
配制浓度为0.1g/mL的PVA水溶液；
2.虫漆酶PVA溶液的配制
2-1.缓冲溶液的配制
0.004g/mL醋酸钠水溶液，加入经过稀释的醋酸水溶液，调节pH至5得缓冲溶液，
2-2.虫漆酶PVA溶液的配制
1mL缓冲溶液加入0.010g -0.029g虫漆酶得虫漆酶缓冲溶液；1ml虫漆酶缓冲溶液中添加0.001g稳定剂混合均匀，加入稳定剂的虫漆酶缓冲溶液离心取上清液，每1ml上清液加入6mLPVA水溶液得浓度为1.5-4.0mg/mL的虫漆酶PVA溶液；
3.包埋虫漆酶的PVA凝胶片的制备
将虫漆酶PVA溶液通过磁力搅拌均匀，放入模具，冻融制成包埋虫漆酶的PVA凝胶片；
B.包埋愈创木酚的PVA凝胶片的制备
1.PVA水溶液的配制
PVA水溶液的配制与步骤A中一致；
2.愈创木酚PVA溶液的制备
40mL PVA水溶液中加入0.1488-0.2976g愈创木酚， 得浓度为30-60mM的愈创木酚PVA溶液；
3.包埋愈创木酚的PVA凝胶片的制备
将愈创木酚PVA溶液磁力搅拌均匀，倒入模具，冻融制得包埋愈创木酚的PVA凝胶片。
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