[发明专利]一种定量检测鸡蛋中氟苯尼考的嵌合ELISA试剂盒及其制备方法

说明书

本发明实施例公开了一种定量检测鸡蛋中氟苯尼考的嵌合ELISA试剂盒，所述ELISA试剂盒包括氟苯尼考单克隆抗体、氟苯尼考偶联抗原、基准液、酶标物、包被所述氟苯尼考偶联抗原的酶标板，以及用于ELISA实验的显色液、终止液和稀释液；所述基准液用于作为空白对照组的溶液；测定待测样品时，同时检测空白对照组和待测样品组的OD值，通过所述OD值计算得到所述待测样品的浓度。本发明实施例提供的定量检测鸡蛋中氟苯尼考残留的检测试剂盒，其操作简便，可批量快速准确检测，且成本低、稳定性好，需要的技术含量不高。

技术领域

本发明实施例涉及生物检测技术领域，具体涉及一种定量检测鸡蛋中氟苯尼考的嵌合ELISA试剂盒及其制备方法。

背景技术

氟苯尼考是酰胺醇类第3代动物专用抗菌药，其具有广谱、高效、吸收好、体内分布广、无致再生障碍性贫血作用等特点，作为氯霉素的替代药物被广泛用于治疗畜禽的细菌性疾病。氟苯尼考具有胚胎毒性和耐药性，在畜禽生产上的大量应用也导致其在畜禽产品中残留，危害人体的健康。目前，针对氟苯尼考检测的试剂盒，往往需要一套系列标准品，这样不仅增加了工作量，而且为了标准曲线线性复合，对操作要求极高；系列标准品的使得一盒96T规格的试剂盒，所需检测的样本数量多，试剂盒的操作复杂，检测结果的稳定性差，检测精密度差，检测所需的时间长。

发明内容

为此，本发明实施例提供一种定量检测鸡蛋中氟苯尼考的嵌合ELISA试剂盒及其制备方法，以解决现有技术中试剂盒操作麻烦，检测结果稳定性差的问题。

为了实现上述目的，本发明实施例提供如下技术方案：

一种定量检测鸡蛋中氟苯尼考的嵌合ELISA试剂盒，所述ELISA试剂盒包括氟苯尼考单克隆抗体、氟苯尼考偶联抗原、基准液、酶标物、包被所述氟苯尼考偶联抗原的酶标板，以及用于ELISA实验的显色液、终止液和稀释液；所述基准液用于作为空白对照组的溶液；

测定待测样品时，同时检测加入基准液的空白对照组和待测样品组的OD 值，通过所述OD值计算得到所述待测样品的浓度。

优选的，所述基准液为硼酸、氢氧化钠、色氨酸和乙二胺四乙酸的水溶液。

优选的，所述单克隆抗体是通过氟苯尼考FF3C11细胞株制备得到的，所述氟苯尼考FF3C11细胞株已于2019年7月4日保藏于位于中国武汉武汉大学中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：C2019152。

本发明实施例还包括：储存有预先建立的用于计算待测样本中氟苯尼考含量的标准曲线的数据处理装置。

优选的，所述标准曲线建立包括：利用标准品稀释液配成不同质量浓度的氟苯尼考标准品溶液，用缓冲液稀释的氟苯尼考抗体，用缓冲液稀释的所述酶标物，进行间接ELISA测定，计算各浓度氟苯尼考的结合率，并以氟苯尼考的结合率为纵坐标、氟苯尼考浓度为横坐标，建立IC₅₀最低的氟苯尼考抑制标准曲线。

优选的，所述酶标液为羊抗鼠IgG-HRP溶液。

本发明实施例还提供一种制备所述的定量检测鸡蛋中氟苯尼考的嵌合 ELISA试剂盒的方法，其特征在于包括制备基准液，制备氟苯尼考单克隆抗体，配制用于ELISA实验的显色液、终止液和稀释液以及将所述氟苯尼考偶联抗原包被在酶标板上的过程。

优选的，所述基准液为硼酸、氢氧化钠、色氨酸和乙二胺四乙酸的水溶液。

优选的，所述单克隆抗体是通过氟苯尼考FF3C11细胞株制备得到的，所述氟苯尼考FF3C11细胞株已于2019年7月4日保藏于位于中国武汉武汉大学中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：C2019152。