[发明专利]一种对EB病毒LMP1C端蛋白特异性结合的多肽及其应用

说明书

本发明涉及一种对EB病毒LMP1 C端蛋白特异性结合的多肽及其应用。首次揭示了一种对EB病毒LMP1 C端蛋白具有结合亲和力的多肽；本发明还提供了该多肽的在诊断检测中的应用，并作为靶向载体在药物或分子靶向试剂的诊断或治疗用途。

技术领域

本发明涉及生物医药领域，更具体地，本发明涉及一种对EB病毒LMP1C端蛋白特异性结合的多肽及其应用。

背景技术

EB病毒（Epstein-Barrvirus,EBV）属于人类疱疹病毒，在人群中感染普遍。EB病毒不仅是传染性单核细胞增多症的病原，并与鼻咽癌（NPC）、口腔腺体肿瘤、淋巴瘤、何杰金氏病、胃癌以及器官移植后的B细胞淋巴瘤、艾滋病相关的淋巴瘤等密切相关。据统计全世界鼻咽癌（NPC）病例中约80％发生于我国，尤其我国南方为高发区，但至今尚无有效的疫苗和特异性的防治方法。研究提示，几乎100％未分化和低分化NPC患者均潜伏感染EB病毒，且在鼻咽癌组织中均能够检测到EB病毒的基因组及其表达的相应蛋白。EB病毒潜伏感染时，主要表达六种核蛋白（EBNA）和潜伏膜蛋白（Latentmembraneprotein，LMP）1和2。LMP1为EB病毒恶性转化基因，可诱导B淋巴细胞转化；LMP1(187～386aa)是游离于胞浆区的200个氨基酸，含有三个功能结构域，即C末端活化区域（C-termina1activationregion）CTAR1，CTAR2和CTAR3，这三个结构域提供了信号分子对接蛋白的结合位点，如TNFR相关因子(TRAFs),TNFR相关死亡结构域(TRADD),受体相互作用蛋白激酶(RIP),和BS69等，通过NF-кB,p38-SAPK,PI3-K/Akt，ERK-MAPK和JAK/STAT等信号通路转导细胞信号。从而产生促进细胞增殖、抑制细胞凋亡，增强细胞迁移等多种生物学作用。如C端功能区的CTRA1和CTAR2可直接与TNFR相关因子蛋白或TNFR相关死亡结构域(TRADD)结合,进而激活NF-кB的活性,促进细胞增生；CTAR3通过募集JAK3,进而活化STAT3。因此，EBVLMP1的187～386aa，即LMP1C端蛋白在EBV诱导细胞转化和癌变过程中发挥重要作用。因此，LMP1C端蛋白是EB病毒相关肿瘤预防和治疗研究的理想靶抗原之一。

靶向治疗是目前肿瘤治疗中最具希望的方法和策略。以表皮生长因子受体（EGFR）和肿瘤血管生成为靶点进行治疗，如EGFR单克隆抗体（赫赛汀），HER2单抗（西妥昔单抗）、贝伐单抗、小分子化合物酪氨酸激酶拮抗剂（舒尼替尼）等，通过特异性阻断肿瘤细胞的信号传导或是通过封闭受体阻止肿瘤血管生成，从而抑制肿瘤细胞生长或促使肿瘤细胞凋亡。但基于抗体分子的靶向治疗仍然存在其应用的局限性，如渗透性差、成本昂贵、具有较强的免疫原性和毒副反应严重等有待进一步研究改善。尤其毒副作用产生的毒性效应已经成为发展针对肿瘤治疗性抗体的主要障碍，产生肝、肾及神经系统毒性而使其功能降低。用同位素标记抗体进行放射性免疫治疗也会导致骨髓抑制等。

基于上述说明，本领域仍然亟待研究靶向性治疗EB病毒感染及其相关肿瘤的新药物或新方法，以改善目前临床现状。

发明内容

本发明的目的在于提供一种对EB病毒LMP1C端蛋白特异性结合的多肽及其用途。

本发明的第一方面，一种对EB病毒LMP1C端蛋白具有结合亲和力的多肽，多肽是以如SEQIDNO:1所示的葡萄球菌A蛋白Z段的氨基酸序列作为骨架，进行12-20个氨基酸变异后获得的多肽。

在另一优选例中，对EB病毒LMP1C端蛋白具有结合亲和力的多肽在如SEQIDNO:1所示的葡萄球菌A蛋白Z段的氨基酸序列的第9-11，13-14，17-18，24-25，27-28，32，35位上发生氨基酸突变。

在另一优选例中，对EB病毒LMP1C端蛋白具有结合亲和力的多肽在如SEQIDNO:1所示的葡萄球菌A蛋白Z段的氨基酸序列的第9-11，13-14，17-18，24-25，27-28，32，35位上发生氨基酸突变，包括

第9位氨基酸突变为R或L；