[发明专利]一种近红外光控制的动态调控系统及其应用有效
申请号: | 201910836782.5 | 申请日: | 2019-09-05 |
公开(公告)号: | CN110551669B | 公开(公告)日: | 2022-05-06 |
发明(设计)人: | 陈修来;丁强;刘立明;李洋;刘佳;罗秋玲 | 申请(专利权)人: | 江南大学 |
主分类号: | C12N1/21 | 分类号: | C12N1/21;C12N15/70;C12P7/26;C12R1/19 |
代理公司: | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人: | 林娟 |
地址: | 214000 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 红外光 控制 动态 调控 系统 及其 应用 | ||
1.一种工程菌株,其特征在于,所述工程菌共同表达近红外光光敏色素、乙偶姻合成途径相关基因、近红外光光响应组分和靶蛋白,所述近红外光光敏色素包括Bphs、Bpho、Yhjh和Mrkh;所述近红外光光响应组分包括启动子PmrkA;所述Bphs的氨基酸序列如SEQ IDNO.14所示,所述Bpho的氨基酸序列如SEQ ID NO.15所示,所述Yhjh的氨基酸序列如SEQ IDNO.16所示,所述Mrkh的氨基酸序列如SEQ ID NO.17所示,所述PmrkA的核苷酸序列如SEQ IDNO.5所示;所述乙偶姻合成途径相关基因budA、budB,所述budA核苷酸序列如SEQ ID NO.9所示,所述budB核苷酸序列如SEQ ID NO.10所示;
编码靶蛋白的基因位于启动子PmrkA下游;
所述靶蛋白为RpoS;所述RpoS的氨基酸序列如SEQ ID NO.18所示;
以E.coli F0601为宿主细胞。
2.如权利要求1所述的工程菌株,其特征在于,编码所述Bphs的核苷酸序列如SEQ IDNO.1所示,编码所述Bpho的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示,编码所述Yhjh的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示,编码所述Mrkh的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示。
3.一种生产乙偶姻的方法,其特征在于,将权利要求1或2所述工程菌株单菌落接种至LB培养基中进行活化,活化后接入发酵培养基进行发酵。
4.如权利要求3所述的方法,其特征在于,所述发酵的条件为35-38℃,200-220rpm,活化后的初始OD600为0.04-0.1,发酵70-75h;或,发酵条件为35-38℃,480-530rpm,活化后的初始OD600为0.04-0.1,接种量为5-10%,装液量为40%-60%,初始pH为6.0-7.0,通气量为1-2vvm,发酵70-80h。
5.权利要求1或2所述的工程菌株在制备乙偶姻中的应用。
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