[发明专利]一种以种子为外植体建立的太白贝母鳞茎再生体系方法

权利要求书

1.一种以种子为外植体建立的太白贝母鳞茎再生体系方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1：获取太白贝母种子；

S2：对所述太白贝母种子进行预处理得到预处理种子；

S3：对所述预处理种子进行消毒得到消毒种子；

S4：对所述消毒种子进行种子诱导愈伤处理得到疏松颗粒状愈伤组织；

S5：将所述疏松颗粒状愈伤组织放入加有6-BA和2,4-D的培养基上增殖，连续增殖三代得到大量的所述的疏松颗粒状愈伤组织，其中30-40天为一代；

S6：将所述疏松颗粒状愈伤组织接种于诱导分化培养基中进行分化并得到小鳞茎，其中放置诱导分化培养基的培养室的温度28±1℃，空气相对湿度70％-80％，光照时间12小时/天，光照强度2000Lx，45天继代一次；

S7：接种所述小鳞茎于生根培养基中并诱导生根得到生根无菌苗，所述生根培养基所在培养室的培养温度为28±1℃，空气相对湿度70％-80％，光照时间12小时/天，光照强度2000Lx；

S8：将所述生根无菌苗放置到培养瓶中并转移到大棚中培养1周得到初期生根苗；

S9：继续培养所述初期生根苗3-4天得到加强生根苗，继续培养的过程中逐渐打开所述培养瓶的瓶口；

S10：将所述加强生根苗从所述培养瓶中取出并洗净所述生根培养基，将所述加强生根苗在1000倍的多菌灵溶液中浸泡10min得到转移生根苗；

S11：移植所述转移生根苗到基质中；

S12：每经过一次预定时间后浇施添加NAA的MS营养液；

S13：在所述基质上覆盖薄膜，经过一周后揭膜。

2.根据权利要求1所述的以种子为外植体建立的太白贝母鳞茎再生体系方法，其特征在于：

步骤S2具体包括：

S21：清水清洗所述太白贝母种子x小时，得到清水种子；

S22：用第一预设溶液清洗所述清水种子，得到第一种子；

S23：用50-80mg/L的GA3溶液浸泡24h得到预处理种子。

3.根据权利要求1所述的以种子为外植体建立的太白贝母鳞茎再生体系方法，其特征在于：

步骤S3具体包括：

S31：用75％乙醇溶液浸泡所述预处理种子60-40s得到乙醇太白贝母种子；

S32：用无菌水清洗所述乙醇太白贝母种子3次得到水洗种子；

S33：用0.1％升汞溶液浸泡所述水洗种子；

S34：用无菌水清洗所述水洗种子5-6次得到消毒种子。

4.根据权利要求1所述的以种子为外植体建立的太白贝母鳞茎再生体系方法，其特征在于：

步骤S4具体包括：

S41：将所述消毒种子接种在初代种子诱导愈伤细胞团的培养基中，所述培养基放置在培养室中，所述培养室的培养温度为15±1℃；

S42：对所述培养基进行遮光处理30天；

S43：对所述培养基进行光照处理30-45天并得到疏松颗粒状愈伤组织，

其中光照处理为光照强度2000Lx，光照时间12小时/天。

5.根据权利要求1所述的以种子为外植体建立的太白贝母鳞茎再生体系方法，其特征在于：步骤S11中的基质具体为椰糠：菜园土：珍珠岩：蛭石＝1:3:2:1。