[发明专利]一株枯草芽孢杆菌SL-19及其菌剂的制备方法和应用

说明书

本发明公开的一株枯草芽孢杆菌SL‑19，已于2019年07月08日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.18089。本发明还公开了上述枯草芽孢杆菌SL‑19的菌剂制备方法，制得的菌剂中活孢子数≥50亿/ml，本发明枯草芽孢杆菌SL‑19菌剂可以作为生物农药用于西瓜有机栽培及西瓜根结线虫的生物防治。

技术领域

本发明属于生物防治植物病害技术领域，具体涉及一株枯草芽孢杆菌 SL-19，本发明还涉及上述枯草芽孢杆菌SL-19的菌剂制备方法，本发明还涉及上述枯草芽孢杆菌SL-19的菌剂应用。

背景技术

根结线虫(Meloidogyne spp)是一类杂食性的植物内寄生线虫，无严格的寄主特异性，能侵染多种农作物，可造成植物根系膨大死亡，且用化学方法难于防治，属于严重危害农业生产的一类顽固性土传病原，每年造成全球数千元亿美元的损失。根结线虫广泛分布，寄主范围广泛，它除直接危害外，还能传播细菌和真菌病害，造成许多经济作物的更大损失。西瓜是一种传统而重要的经济作物，具有解暑生津、利尿消肿、消除疲劳等功效。近年来，随着我国经济的高速发展以及人们对粮食、食品安全的逐渐重视，人们对水果的品质和产量有着很高的要求，求其针对西瓜而言，需求量大且对西瓜品质要求高，但由于，我国随着西瓜连载面积的扩大以及连作时间的延长，土壤传播的根结线虫病危害日趋严重已成为严重影响西瓜产品安全的疑难病害之一，严重导致了西瓜的减产以及品质的下降。

根结线虫病的防治目前多采用化学防治、轮作及抗病品种，但效果均不太理想，且存在诸多弊端。如目前使用的化学杀线虫剂多为剧毒或高毒、高残留农药，对土壤微生物、植物、水源和大气层带来严重污染或破坏，同时病菌和线虫抗药性问题也日益突出，而且药物在植物体内残留会间接对人类造成危害。因此急需开发对环境友好，对人畜无毒的防治线虫病害的有益微生物菌剂。

发明内容

本发明的目的在于提供一株枯草芽孢杆菌SL-19，在土壤和植物表面易于存活、繁殖及定植；本发明的另一目的在于提供上述枯草芽孢杆菌SL-19 菌剂的制备方法，制备的菌剂不仅能够有效的防治西瓜根结线虫病害，还能提高西瓜品质以及促进生长；本发明的再一目的在于提供上述枯草芽孢杆菌 SL-19菌剂的应用。

本发明所采用的第一种技术方案是：一株枯草芽孢杆菌SL-19，已于2019 年07月08日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCCNo.18089。

本发明所采用的第二种技术方案是：一种上述枯草芽孢杆菌SL-19的菌剂制备方法，包括以下步骤：

步骤1)：菌种固体斜面活化培养

将枯草芽孢杆菌SL-19菌株接入固体斜面，在斜面培养基中培养，温度为28-33℃，培养时间42-72h；

步骤2)：一级种子液扩大培养

将步骤1)的枯草芽孢杆菌SL-19接种到盛有1000ml一级种子液培养基中摇瓶培养24-36h，培养温度26-31℃，转速230-280r/min；

步骤3)：二级种子液发酵培养

按3％接种量将步骤2)种子液接种到200L种子发酵罐中，培养基采用优化培养基，在28-33℃保温培养10-18h，同时辅以转速230-280r/min，通气量0.3-0.6m³/min，进行发酵培养；

步骤4)：发酵培养