[发明专利]一种具有PEDV中和活性的单克隆抗体

说明书

本发明公开了一种具有PEDV中和活性的单克隆抗体。本发明所提供的具有PEDV中和活性的单克隆抗体是由“具有PEDV中和活性的单克隆抗体杂交瘤细胞株SWS‑②”分泌产生。所述“具有PEDV中和活性的单克隆抗体杂交瘤细胞株SWS‑②”在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的登记入册编号为CGMCC No.18312。本发明通过制备具有PEDV中和活性的单克隆抗体，使新生仔猪口服该抗体，可有效减少仔猪的染病几率，并且在同居感染实验中保护率达到100％。结果表明，具有PEDV中和活性的单克隆抗体可有效提高新生仔猪体内的抗体含量，并降低患病风险，且该方法制备简单，操作方便，具有较大应用前景。

技术领域

本发明涉及基因工程领域，具体涉及一种具有PEDV中和活性的单克隆抗体。

背景技术

猪流行性腹泻(PED)是一种高度接触性的猪肠道传染病，哺乳仔猪的死亡率高达100％。主要症状为呕吐、水样腹泻、脱水以及仔猪的高死亡率。病猪肛门周围有大量黄色、恶臭味的粪便，剖检可见小肠扩张，充满黄色液体，肠系膜充血，淋巴结水肿，绒毛短。在哺乳期仔猪中发病率和死亡率较高，造成重大的经济损失。

猪流行性腹泻病毒(PEDV)属于冠状病毒，基因组结构为单股正链RNA。S蛋白位于病毒粒子的外表面，是病毒入侵宿主细胞的关键，同时也是产生中和抗体的主要靶点。由于S蛋白可变区的多变性，导致PEDV的变异较快，因此目前缺乏有效的针对各变异株的疫苗。

近些年，关于PED不仅在亚洲国家被大量报道，甚至在欧美国家也广泛流行。作为养猪大国，腹泻病原导致仔猪死亡从而给养猪业造成极大的危害。然而，国内外针对PED疫苗的应用尚存在许多问题，如免疫效果差，副作用较大等。

发明内容

本发明的目的是提供一种具有PEDV中和活性的单克隆抗体。

第一方面，本发明要求保护一个能够分泌具有PEDV中和活性的单克隆抗体的杂交瘤细胞株。

本发明所要求保护的杂交瘤细胞株具体为“具有PEDV中和活性的单克隆抗体杂交瘤细胞株SWS-②”，在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的登记入册编号为CGMCC No.18312。

第二方面，本发明要求保护单克隆抗体。

本发明所要求保护的单克隆抗体为由前文所述“具有PEDV中和活性的单克隆抗体杂交瘤细胞株SWS-②”分泌产生的单克隆抗体。

第三方面，本发明要求保护将前文第二方面所述的单克隆抗体用标记物进行标记后形成的标记抗体。

其中，所述标记物可为辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶、生物素、异硫氰酸荧光素、荧光染料Cy3、荧光染料Cy5、磁珠或琼脂糖等。

第四方面，本发明要求保护包被有前文所述单克隆抗体的固相载体。如包被有所述单克隆抗体的ELISA预包被酶标板。

第五方面，本发明要求保护试剂盒。

本发明所要求保护的试剂盒为含有前文所述单克隆抗体或所述标记抗体或所述固相载体的试剂盒。

第六方面，本发明要求保护前文所述“具有PEDV中和活性的单克隆抗体杂交瘤细胞株SWS-②”或所述单克隆抗体或所述标记抗体或所述固相载体或所述试剂盒在如下任一中的应用：

(A1)制备用于预防和/或治疗猪流行性腹泻的产品；

(A2)制备用于预防和/或治疗感染猪流行性腹泻病毒的猪的产品；

(A3)中和猪流行性腹泻病毒，或制备用于中和猪流行性腹泻病毒的产品；

(A4)结合猪流行性腹泻病毒S蛋白，或制备用于结合猪流行性腹泻病毒S蛋白的产品。